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最近做EMSA，EB染色后DNA片段一直看不到。想请教有经验的前辈一些问题！！！！！ 启动子必须加探针标记吗？？？很无知无助无力了。。我现在只用了纯化后的启动子片段跟蛋白孵育后跑Native-PAGE，用考马斯染蛋白有正确条带，很正常。 但是用EB染色20min紫外照胶却看不到DNA条带，不知道什么原因。是不是DNA浓度低，有没有做相关的实验，能否告知一下您的实验条件参考一下，，不胜感激！！！！！ 发自小木虫Android客户端 |
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armigera
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5楼2022-08-05 05:29:10
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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根据我曾经的经验，自由探针(未结合蛋白)是大多数, 结合的只是少数。所以你能看到总的dna并不能代表能看到结合的条带。以上是我的推测，欢迎一起讨论。 我之前用同位素标记的，没有做过未标记直接染色的。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2022-08-05 21:38:35
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