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王小木南

新虫 (小有名气)

[求助] RNA与DNA杂交实验

求助做过单链DNA与RNA杂交的小伙伴,他们的杂交需要额外的条件么。我们实验室经常做DNA分子的杂交,只要体系中有互补片段,他们的杂交是非常容易的,不知道DNA与RNA杂交需要什么条件呢

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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明月千古

木虫 (著名写手)

DNA95℃变性后,降到65℃再加RNA进行杂交

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2楼2021-12-25 19:37:31
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王小木南

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 明月千古 at 2021-12-25 19:37:31
DNA95℃变性后,降到65℃再加RNA进行杂交

您好,DNA 95℃变性是为了解旋成单链么,DNA与RNA的杂交是一定要在65℃下才能发生么(因为DNA与DNA的杂交在室温下瞬间就可以实现呢),另外需要额外的杂交缓冲液么,感谢您的赐教~

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3楼2021-12-26 11:45:26
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明月千古

木虫 (著名写手)

是的,杂交温度要看你的目的要求,如果特异性,灵敏度没要求那常温当然也可以杂交,另外杂交缓冲液是需要的,还应加上RNase block

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4楼2021-12-26 14:15:20
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王小木南

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 明月千古 at 2021-12-26 14:15:20
是的,杂交温度要看你的目的要求,如果特异性,灵敏度没要求那常温当然也可以杂交,另外杂交缓冲液是需要的,还应加上RNase block

非常感谢您的赐教,我是要做特异性鉴别的,灵敏度当然也是越高越好,为了降低非特异杂交,是不是要尽量提高杂交温度呢,另外杂交缓冲液一般都用什么呢~

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5楼2021-12-26 15:17:02
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jmqt7140

新虫 (正式写手)


推荐给你一个网站,https://www.engreen.cn/,上面有很多关于杂交的内容,可以搜索看看
6楼2021-12-28 10:15:44
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