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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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这周你汇报

新虫 (小有名气)

[求助] 环介导等温扩增LAMP相关问题求解答，万分感谢！已有5人参与

最近刚接触LAMP，用primer explorer设计了内引物和外引物，暂时没有加环引物。参考了文献中的LAMP反应体系，用钙黄绿素进行检测。第一次按照文献中的方法模板DNA 1 微升、钙黄绿素浓度为25 微摩尔每升，钙黄绿素加入体系后基本看不到颜色，观察不到扩增前后的变化，最后拿去跑电泳，发现根本没有条带。第二次改进实验，加了2微升模板DNA，钙黄绿素浓度也增加了，但是水浴60分钟后溶液还是橙红色，应该是没扩增，拿去跑电泳，依然啥也没有。第一条道Marker是100bp的，中间是我测的扩增之后的，最后两条道是扩增前的。不知道是哪里出了问题，是一开始引物就不对吗？求大神解答 万分感谢

@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
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1楼2021-03-25 00:43:43
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琛琛：

新虫 (正式写手)
我最近也在做LAMP，希望多多交流！

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6楼2021-04-15 08:04:07
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高高高

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你做完了再加试一下颜色变化
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2楼2021-03-26 11:15:46
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这周你汇报

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 高高高 at 2021-03-26 11:15:46
你做完了再加试一下颜色变化

谢谢，后面没有加钙黄绿素，直接去跑电泳，能看到扩增出来了。
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4楼2021-04-14 18:00:01
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甜心一号

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 这周你汇报 at 2021-04-22 00:52:42
哭了 我最近一周做有时候水也有条带 有时候又没有。我不知道从哪里找原因了 头大
...

我也是做的头疼，老板还要做多重lamp，还要开盖检测
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10楼2021-05-03 14:45:05
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普通回帖

长得不高

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你先确认引物set没有问题，一般钙黄绿素体系中需要Mn2+。最好是看紫外下的荧光，可见光下的颜色变化不是特别明显的。
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3楼2021-04-08 16:55:01
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这周你汇报

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 长得不高 at 2021-04-08 16:55:01
你先确认引物set没有问题，一般钙黄绿素体系中需要Mn2+。最好是看紫外下的荧光，可见光下的颜色变化不是特别明显的。

谢谢，引物set是可行的。后面我试了不加钙黄绿素和氯化锰，就能扩出来了。
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5楼2021-04-14 18:01:41
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这周你汇报

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 琛琛： at 2021-04-15 08:04:07
我最近也在做LAMP，希望多多交流！

太好啦 加个V信 多多交流吧

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7楼2021-04-15 11:48:56
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Amber123456

新虫 (初入文坛)
我也在做LAMP。天天做不出来结果
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这周你汇报
8楼2021-04-21 23:09:02
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这周你汇报

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by Amber123456 at 2021-04-21 23:09:02
我也在做LAMP。天天做不出来结果

哭了 我最近一周做有时候水也有条带 有时候又没有。我不知道从哪里找原因了 头大

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9楼2021-04-22 00:52:42
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