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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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21817085

新虫 (初入文坛)

[交流] 细菌/培养基/蛋白质含量已有1人参与

请问有人测过细菌在培养过程中培养基的蛋白质含量的变化吗？细菌培养一段时间后，离心取上清，我用考马斯亮蓝测上清液的OD595nm，发现OD值没什么变化，是为什么呢？谢谢

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1楼2021-02-25 17:44:23
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小冀-

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这个很难说明问题吧，培养基里面的蛋白会被分解利用，但是细菌死亡之后也会释放蛋白质，这样测只能看个大概吧，感觉说明不了问题，除非培养基中的蛋白质含量培养前后有明显的差别
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2楼2021-02-26 13:25:24
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21817085

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 小冀- at 2021-02-26 13:25:24
这个很难说明问题吧，培养基里面的蛋白会被分解利用，但是细菌死亡之后也会释放蛋白质，这样测只能看个大概吧，感觉说明不了问题，除非培养基中的蛋白质含量培养前后有明显的差别

虽然细菌死亡会释放蛋白质，但理论上蛋白质消耗量比释放量多，毕竟细菌在生长，对吧？但是按照这个理论，我测不出蛋白质含量的变化，是因为检测方法的问题吗？还是离心完要进行蛋白质纯化？
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3楼2021-02-28 14:04:51
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小冀-

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3楼: Originally posted by 21817085 at 2021-02-28 14:04:51
虽然细菌死亡会释放蛋白质，但理论上蛋白质消耗量比释放量多，毕竟细菌在生长，对吧？但是按照这个理论，我测不出蛋白质含量的变化，是因为检测方法的问题吗？还是离心完要进行蛋白质纯化？...

蛋白质不需要纯化，直接测就行。蛋白浓度怎么样？不会是在本底反应的误差范围内吧？如果不是的话，会不会是大分子蛋白，菌株根本不能利用或利用量很小
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4楼2021-03-01 10:10:08
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4楼: Originally posted by 小冀- at 2021-03-01 10:10:08
蛋白质不需要纯化，直接测就行。蛋白浓度怎么样？不会是在本底反应的误差范围内吧？如果不是的话，会不会是大分子蛋白，菌株根本不能利用或利用量很小...

培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧？我没有测具体的浓度，直接测了od值，因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗，我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。
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5楼2021-03-01 15:30:45
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4楼: Originally posted by 小冀- at 2021-03-01 10:10:08
蛋白质不需要纯化，直接测就行。蛋白浓度怎么样？不会是在本底反应的误差范围内吧？如果不是的话，会不会是大分子蛋白，菌株根本不能利用或利用量很小...

培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧？我没有测具体的浓度，直接测了od值，因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗，我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。
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6楼2021-03-01 15:30:48
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小冀-

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6楼: Originally posted by 21817085 at 2021-03-01 15:30:48
培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧？我没有测具体的浓度，直接测了od值，因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗，我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。...

一般培养基的氮源就是无机氮和类似蛋白胨这种蛋白水解物，都是多肽或者氨基酸，很少有提供完整蛋白配置培养基的吧
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7楼2021-03-01 19:34:38
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