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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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王振操

新虫 (小有名气)

[求助] 体外用DCFH测ROS的生成

体外测光敏剂的ROS的生成。在0s的时候有个I0，比较多种光敏剂的生成ROS的速率的时候用I/I0作点线图。但是各种光敏剂在0s的时候可能会增加I0的荧光强度，导致各自I0不同，这时候到最后即使DCFH完全反应完I一样，但是I比I0不一样。请问这时候怎么处理。

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1楼2021-01-25 12:08:16
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
王振操(wolfghost代发): 金币+10, 有效应助奖励~ 2021-03-14 22:34:50
wolfghost: 博学EPI+1 2021-03-14 22:34:55
DCFH测活性氧的原理是因为其本身没有荧光，但是被氧化后变成有荧光的分子。所以你孵育时间足够长的话看，最终所有的DCFH终归会变成有荧光的分子。
如果想测ROS的释放速率，那么最好实验的前提假设是每组所使用的DCFH是大过量的且等量的，这时候可以近似处理为一个一级反应（pseudo-first order reaction），也就是荧光的生成速率只取决于ROS的含量。
具体来说，楼主最好的方法是用deltaI/(Imax - I0) vs 时间做图,只算初始一小段时间的斜率，即计算荧光强度的增速。其中deltaI为某个时间点荧光强度的增量，Imax为最终荧光强度，I0为初始荧光强度
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-01-25 14:44:20
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普通回帖

王振操

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-01-25 14:44:20
DCFH测活性氧的原理是因为其本身没有荧光，但是被氧化后变成有荧光的分子。所以你孵育时间足够长的话看，最终所有的DCFH终归会变成有荧光的分子。
如果想测ROS的释放速率，那么最好实验的前提假设是每组所使用的DC ...

请问有文章里的图嘛

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3楼2021-01-25 21:03:55
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