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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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彼岸流年714

新虫 (正式写手)


已领完
刚做转化不太顺利,求指导
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转化失败来网上逛一圈找找原因,老看到评论下看到一句话,转个空载体看看能长就是连接的问题,我咋这么看不懂这句话呢

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[ Last edited by 彼岸流年714 on 2020-8-5 at 20:29 ]
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彼岸流年714

新虫 (正式写手)


空载体和连接后的载体都有抗性基因呀,能看出啥问题,为啥是连接的问题呢

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3楼2020-08-05 17:00:41
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强仔123

新虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 彼岸流年714 at 2020-08-05 17:00:41
空载体和连接后的载体都有抗性基因呀,能看出啥问题,为啥是连接的问题呢

没连进去?

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18楼2020-08-05 22:12:51
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木冰衿→_→

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
其实不只是空载体,其他质粒都行,做个阳性对照,如果其他质粒能转进去就说明不是你感受态的问题,那大概剧情是连接出问题了

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22楼2020-08-05 23:20:10
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彼岸流年714

新虫 (正式写手)


引用回帖:
18楼: Originally posted by 强仔123 at 2020-08-05 22:12:51
没连进去?
...

不太清楚,第一次做今天刚做了几个对照明天再看看

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23楼2020-08-05 23:21:37
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彼岸流年714

新虫 (正式写手)


引用回帖:
22楼: Originally posted by 木冰衿→_→ at 2020-08-05 23:20:10
其实不只是空载体,其他质粒都行,做个阳性对照,如果其他质粒能转进去就说明不是你感受态的问题,那大概剧情是连接出问题了

那我直接用感受态菌铺无抗性平板看是不是感受态的问题可以吧

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24楼2020-08-05 23:26:16
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强仔123

新虫 (小有名气)


引用回帖:
23楼: Originally posted by 彼岸流年714 at 2020-08-05 23:21:37
不太清楚,第一次做今天刚做了几个对照明天再看看
...

嗯嗯

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31楼2020-08-06 09:38:59
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zshky

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 彼岸流年714 at 2020-08-05 17:00:41
空载体和连接后的载体都有抗性基因呀,能看出啥问题,为啥是连接的问题呢

可以这样理解,试剂盒里的对照按照说明书一定会转化成功的,如果你做了对照,对照没长就说明是感受态出了问题,如果对照长了你自己的没长,那就说明是前面的步骤有问题,大概率就是连接出问题了,可能没连上,如果是TA 克隆,扩增目的片段要用taq酶,还有就是检查下目的目的片段是否纯化这类常规操作问题

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34楼2020-08-06 12:19:33
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彼岸流年714

新虫 (正式写手)


送红花一朵
引用回帖:
34楼: Originally posted by zshky at 2020-08-06 12:19:33
可以这样理解,试剂盒里的对照按照说明书一定会转化成功的,如果你做了对照,对照没长就说明是感受态出了问题,如果对照长了你自己的没长,那就说明是前面的步骤有问题,大概率就是连接出问题了,可能没连上,如果 ...

,明白啦

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38楼2020-08-06 19:45:40
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HK驱魔者

铁虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
连了一个月都没连上

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40楼2020-08-12 17:42:28
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彼岸流年714

新虫 (正式写手)


引用回帖:
40楼: Originally posted by HK驱魔者 at 2020-08-12 17:42:28
连了一个月都没连上

表吓我,我刚送去测序了呢

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41楼2020-08-12 20:40:18
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2020-08-05 16:57   回复  
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2020-08-05 17:06   回复  
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1310040126楼
2020-08-05 17:23   回复  
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Jzhang2137楼
2020-08-05 17:39   回复  
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dan123qwe8楼
2020-08-05 18:01   回复  
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tzynew11楼
2020-08-05 18:21   回复  
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郑宏金12楼
2020-08-05 19:15   回复  
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xtcao66814楼
2020-08-05 21:52   回复  
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xn800815楼
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zshky33楼
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2020-08-06 13:07   回复  
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娜娜lyn36楼
2020-08-06 13:43   回复  
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涵晚39楼
2020-08-06 19:49   回复  
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