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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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tjuwyn

新虫 (小有名气)

[求助] HEK293细胞形态已有2人参与

各位前辈，初尝细胞培养，养的是HEK293T细胞，复苏时细胞分散的挺好，贴壁也挺好的，但是两天后观察细胞表面有很多黑点，成簇生长的细胞看不清形态，很脏的样子，详见图片，请问是支原体污染了吗？

HEK293细胞形态
657977335188420935.jpg
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1楼2020-07-10 09:53:47
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shgnsw

木虫 (著名写手)
支原体污染显微镜下看不出来，可以测一下
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2楼2020-07-10 10:13:59
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博士苑

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
hek 293细胞贴壁型（半贴壁），生长较快，常用于病毒包装使用

你的提问，可以做以下考虑：

1.  细胞代次较高，培养状态不佳

2.  细胞老化：对数生长期活力旺盛细胞较少，死细胞碎片黏附

3.  支原体污染：PCR，设计支原体引物，两轮PCR检测即可（设计阳性对照组、阴性对照组、目的组、空白组，四个组）
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3楼2020-07-10 11:07:34
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wit0329

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主的情况，解决方案是：1，重新购买株系，因为你这个明显使用双抗是解决不了的；2，非要处理的话，得需要清除细菌或支原体的试剂。我不是商家，有一款试剂很好用，我之前就遇到了你说的情况。迪，医，明，自己去搜索吧
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4楼2020-07-12 19:39:47
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huanlele

新虫 (小有名气)
可以到ATCC官网上查一下细胞正常形态，和自己的对比一下看看是不是正常。

发自小木虫IOS客户端
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5楼2020-07-13 07:58:37
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