24小时热门版块排行榜    

查看: 1316  |  回复: 8
【悬赏金币】回答本帖问题,作者yuzhiyin将赠送您 10 个金币

yuzhiyin

金虫 (小有名气)

[求助] pCRISPomyces-2 敲除质粒构建链霉菌已有1人参与

利用pCRISPomyces-2 敲除单个基因,2kb同源臂的设置,是在spacer上下游各设置1kb的同源臂,想问下是紧挨着spacer+PAM上下设置吗,如果这样设置是不是就是只敲除了27bp,还是也可以不紧挨着设置?
回复此楼

» 猜你喜欢

做人事,看天命!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)


可以不紧挨着设计,链霉菌基因敲除不好做啊

发自小木虫Android客户端
2楼2020-07-09 10:50:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuzhiyin

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-09 10:50:13
可以不紧挨着设计,链霉菌基因敲除不好做啊

请教下,不挨着空多大都可以吗?有没有大小要求,上下游几kb可以
做人事,看天命!
3楼2020-07-09 14:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Pioneer X

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yuzhiyin at 2020-07-09 14:07:07
请教下,不挨着空多大都可以吗?有没有大小要求,上下游几kb可以...

同源臂中间的部分是敲除的

发自小木虫Android客户端
4楼2020-08-21 18:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jopersen

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-09 10:50:13
可以不紧挨着设计,链霉菌基因敲除不好做啊

哎,这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过  我一个小硕单独建体系  我太难了 快毕业了  一个突变体筛不到  
太难了!
5楼2020-10-16 10:55:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jopersen

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主做出来了嘛?我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ,后来就没设同源臂去敲单基因了,到现在没有拿到突变体,不知道能不能毕业 !慌得一批
6楼2020-10-16 10:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhl1024

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Jopersen at 2020-10-16 10:55:38
哎,这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过  我一个小硕单独建体系  我太难了 快毕业了  一个突变体筛不到  
太难了!...

咱们做链霉菌的可以交流下,或者建个群我也要耗死了
7楼2021-11-04 15:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张永婧1991

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xhl1024 at 2021-11-04 15:20:11
咱们做链霉菌的可以交流下,或者建个群我也要耗死了...

请问各位大神,后来做了链霉菌基因敲除吗,想咨询方法,感激不尽
8楼2023-05-23 20:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虹之间的停留

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Jopersen at 2020-10-16 10:58:31
楼主做出来了嘛?我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ,后来就没设同源臂去敲单基因了,到现在没有拿到突变体,不知道能不能毕业 !慌得一批

请问; 连上下游各1KB的片段P都P不出来-这个问题最后解决了吗?目前也遇到了这个问题
9楼2023-07-17 15:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuzhiyin 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程与技术320求调剂 +10 Wjrjxmt 2024-03-28 10/500 2024-03-28 21:35 by xiejq2010
[考研] 284求调剂 +7 CTT会上岸! 2024-03-26 7/350 2024-03-28 17:35 by -迷了路啊路
[考研] 欢迎报考烟台大学精准材料高等研究院2024年研究生——一流的设备和师资、央企联培机会 +4 hhl894 2024-03-25 10/500 2024-03-28 17:13 by 无所4事
[考研] 311求调剂 +6 嗯嗯amc 2024-03-22 6/300 2024-03-28 17:02 by 快乐星球123
[精细化工] 有机硅改性环氧树脂 5+3 广州小苏 2024-03-22 3/150 2024-03-28 16:03 by CDMACD
[考研] 309求调剂 +5 @?! 2024-03-28 6/300 2024-03-28 15:21 by renwenfeng
[考研] 315求调剂 +4 无昵称- 2024-03-28 4/200 2024-03-28 15:20 by vivian_sfw
[考研] 297求调剂 +4 木木马哈哈 2024-03-27 4/200 2024-03-28 11:42 by -迷了路啊路
[有机交流] 合成实验紧急求助,各位大神帮忙! 50+4 1595515531 2024-03-26 5/250 2024-03-28 09:33 by 高树桩
[考研] 一志愿985,427求调剂,求求 +11 echo586 2024-03-25 21/1050 2024-03-28 08:41 by echo586
[考研] 307求调剂 +5 早餐晚餐 2024-03-27 6/300 2024-03-27 23:02 by 星空星月
[考研] 314求调剂 +3 惠文浩 2024-03-25 3/150 2024-03-27 13:47 by 储能小站cc
[考研] 想用AI做合成生物学的学硕 +5 Youjun02 2024-03-26 11/550 2024-03-27 12:52 by 小美LH
[考研] 工科学硕296调剂 +3 Altasa 2024-03-23 3/150 2024-03-27 09:50 by 3电子信息
[考研] 304材料专硕求调剂 +5 烟云墨雨飞啊 2024-03-22 5/250 2024-03-27 08:49 by y0203
[考研] 11408 360求调剂 +4 tat13 2024-03-25 6/300 2024-03-26 00:15 by DJ35
[考研] 一志愿北京工业大学,材料工程,总分301求调剂 +9 hss0418 2024-03-24 14/700 2024-03-25 20:28 by EBSD
[职场人生] 中科院苏州纳米所不厚道,过了35降薪不给安家费逼人走 +8 科研人啊 2024-03-23 11/550 2024-03-25 07:30 by lizhiweiouc
[考研] 313求调剂 +3 azuse 2024-03-23 3/150 2024-03-24 13:41 by 旋风马
[论文投稿] IEEE Transactions on Industrial Informatics的审稿周期是多久? +3 mollyzhang_2003 2024-03-22 5/250 2024-03-23 07:02 by mollyzhang_2003
信息提示
请填处理意见