24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 2622  |  回复: 15
【悬赏金币】回答本帖问题,作者落日余晖34将赠送您 50 个金币

ChengI_Lee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

类似问题,转化后菌落PCR无活性,总感觉感受态浓度特别高,有点浓稠,是对的吗?
11楼2020-07-27 20:56:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪色残洋

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 落日余晖34 at 2020-03-22 08:15:27
连接不成功的话可以考虑无缝克隆连接
...

我后面也自己电转,涂板后跟你这个情况类似。。。

发自小木虫Android客户端
12楼2020-07-30 22:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬瓜皮2020

新虫 (初入文坛)

我的也是一直电转,长不出来,想知道楼主解决了吗

发自小木虫Android客户端
13楼2021-04-02 06:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouyoutu

木虫 (正式写手)

可可

1:GS115电转的感受态必须很浓稠,200uL移液枪不太好吸得那种感觉最好。
2: 10ug重组质粒线性化后,用洗涤柱回收,有再测浓度吗?手册上写电转时要有10ug的线性化的重组质粒,实际操作至少也要有5ug以上。(我的经验是10ug转,感受态可以稀一点,5ug转的话,感受态就要很浓稠,参考第1点)。
3:电转后,孵育的时间不够,我记得手册上写在电转后,先冰育,然后再加入几ml山梨醇在30度孵育2小时,然后再加入培养基30度继续孵育1小时。因为你是用zeocin抗性,电转后要是没有孵育好,感受态没有回复正常,就算转进去了,也不容易在有抗性的的平皿上生长。如果你用组氨酸缺陷筛选,就不需要孵育这么久,甚至不需要孵育。
14楼2021-04-08 16:58:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zouyoutu

木虫 (正式写手)

可可

4:还有就是Zeocin浓度 50μg/ml时,转化子会多一些。 100μg/ml也行,但转化子会少。现在你没有转化子出现,建议 50μg/ml和100μg/ml各做一板。
15楼2021-04-08 17:02:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

12zhangjie

铁虫 (小有名气)

pPICαA用SacI线性化的吗?
16楼2021-09-17 08:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落日余晖34 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 考研,求职还是考编? +11 xizj 2024-04-21 19/950 2024-04-24 10:36 by 肯德基到家
[论文投稿] 期刊推荐 20+4 木颜尘ip 2024-04-22 7/350 2024-04-24 10:06 by bobvan
[考博] 真的好想读博! +8 wangzhe_bs 2024-04-22 10/500 2024-04-24 09:42 by 安塔瓦拉多
[考博] 博士招生 +3 zx179 2024-04-24 5/250 2024-04-24 09:35 by Eskey
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +5 wangyp123 2024-04-23 6/300 2024-04-24 09:32 by 安塔瓦拉多
[教师之家] 找工作过程中碰到好多人问南京某新换校长211的政策,规定如下 +15 ZHONGWU_U 2024-04-21 17/850 2024-04-24 05:12 by juta256
[论文投稿] 最近遇到这样一个问题 +4 asd123gfa689 2024-04-18 11/550 2024-04-23 20:14 by asd123gfa689
[考博] 山东大学化学与化工学院刘磊课题组博士研究生招生启事 +7 sdorganic 2024-04-17 9/450 2024-04-23 16:28 by 让一切随风l
[考博] 研二光催化6月底4篇2区 +7 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-23 06:59 by byron2012
[论文投稿] 国家重点研发计划论文可以发MDPI里的期刊吗 +6 lin_2018 2024-04-17 6/300 2024-04-22 17:32 by 20094958
[高分子] 请问UV灯是365nm的,那么选光引发剂的波长选多少的?要完全一致吗? +4 engledd2004 2024-04-21 4/200 2024-04-22 16:08 by wangcz23
[考博] 25申博记录贴 +6 我属驴核动力驴 2024-04-18 12/600 2024-04-22 15:50 by 诩雾
[考研] 问题已经解决。 +13 lekinna 2024-04-19 30/1500 2024-04-22 13:09 by 矛dei到
[基金申请] 国社科项目,你们学校都限额申报吗? +5 屡战屡败 2024-04-21 7/350 2024-04-22 13:03 by 屡战屡败
[考研] 博士生招生!! +3 2458827884 2024-04-19 3/150 2024-04-22 12:37 by 钰波love
[考研] 312求调剂 +3 Leroic000 2024-04-19 3/150 2024-04-20 18:19 by xinaishan
[论文投稿] 一审一个审稿人,小修,会怎么样呀? +10 林师妹 2024-04-18 10/500 2024-04-20 18:08 by 肖虫家
[基金申请] 国自然青年基金只有一篇能第一标注,其他都是第二标注能结题吗? 10+4 lice_1987 2024-04-18 6/300 2024-04-19 08:29 by kudofaye
[论文投稿] 投稿求助 5+3 我是洲洲啊 2024-04-17 5/250 2024-04-18 17:13 by topedit
[考研] 工学322,英语六级求调剂 +3 domax 2024-04-17 10/500 2024-04-17 21:25 by 东方花园小万
信息提示
请填处理意见