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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


[交流] real-time PCR的问题疑惑

请问real-time PCR用于探针法的引物可用于染料法的吗?因为参考文献很多都是探针法的,染料法比较少,所以不知道这两种方法所用的引物要求有什么不同?
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skull123

木虫 (正式写手)



宇宙小妖怪(金币+1): 谢谢参与
可以,
2楼2020-03-03 13:38:21
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
宇宙小妖怪(金币+1): 谢谢参与
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2020-03-11 08:08:18
有时候可以,但是往往不是最合适的。

Taqman一般以100bp以内为宜,

sybr片段则需要长一些,150~250
3楼2020-03-03 14:18:32
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)


★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2020-03-11 08:08:31
染料法与探针法的引物可以通用,但是前体是你对PCR体系进行优化,使在保证灵敏度比改变的情况下引物浓度尽量的少。因为染料法对引物二聚体也有荧光信号,以上操作是你要保证引物二聚体尽量少。另外染料法需要做溶解曲线,如果溶解曲线主峰前面的线比较平滑没什么杂峰,说明引物没问题。在曲线这块BIOG和ROCHE还是很典型的。
5楼2020-03-04 08:58:50
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Jarvis文祥

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不少研究都是用染料激光器

发自小木虫IOS客户端
8楼2020-03-09 07:56:55
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简单回复
nono20094楼
2020-03-03 16:09   回复  
宇宙小妖怪(金币+1): 谢谢参与
·
2020-03-06 21:06   回复  
宇宙小妖怪(金币+1): 谢谢参与
2020-03-08 21:09   回复  
宇宙小妖怪(金币+1): 谢谢参与
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