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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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XM学士

木虫 (小有名气)

[交流] western blot内参不齐,是一抗回收效果不好还是上样量调整的问题?

1.一抗的重复利用问题,我用can get signal 的solution1稀释,0.01%叠氮化钠。原来可以重复五六次,现在只能用一次。同一张膜,用第二次的抗体结果不好,内参浓淡不一,但是再用新配的抗体染,会稍微齐一点。请问这是什么原因?抗体染菌或者变质吗?可是一般这样不是会出现高背景或者黑点吗?怎么会浓淡不一呢?
2.跑之前会BSA定量统一浓度。每次跑电泳会根据前一次的条带深浅来调上样量,但是没什么效果,甚至越调越不齐。请问是什么原因?
(一共跑了三次电泳,同一张膜用不同时间稀释的抗体染过两次)

western blot内参不齐,是一抗回收效果不好还是上样量调整的问题?


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生命在于运动
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XM学士

木虫 (小有名气)

生命在于运动
2楼2020-02-25 22:15:01
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Northwolv

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主问题解决了吗?最近也遇到了相同的问题
3楼2021-08-08 17:53:19
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