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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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菜鸟木木

新虫 (初入文坛)

[求助] 细菌鉴定 16S rRNA 序列NCBI比对到3个种,怎么确定选那个种?已有2人参与

细菌鉴定 16S rRNA 序列NCBI比对到3个种,两个问题:
1、都是100%,大部分是枯草芽孢杆菌,怎么看这个比对结果?怎么确定选那个种?
2、需要进一步做鉴定的话,再做什么工作?

细菌鉴定 16S rRNA 序列NCBI比对到3个种,怎么确定选那个种?
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给你的温柔

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
选前20个左右,构建进化树,看进化关系,进化树构建方法百度搜一下,还有大部分细菌分离鉴定的论文里都有进化树的解释,加油。
fighting!
2楼2020-01-01 12:09:04
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zg14151

新虫 (正式写手)

3楼2020-01-02 12:33:57
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狗狗狗尾巴草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你测出来的16S序列是全长么?如果不是,建议扩增后连载体,测全长序列,再比对一下。
4楼2020-01-02 19:43:58
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菜鸟木木

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 狗狗狗尾巴草 at 2020-01-02 19:43:58
你测出来的16S序列是全长么?如果不是,建议扩增后连载体,测全长序列,再比对一下。

用27F和1492R引物,PCR产物直接测序,测回来的长度为1369bp,我看许多文章里用这两个。但也有说用27F和1541R,测出来的片段能到1500bp。您一般用那一对引物啊?
5楼2020-01-03 09:51:04
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狗狗狗尾巴草

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 菜鸟木木 at 2020-01-03 09:51:04
用27F和1492R引物,PCR产物直接测序,测回来的长度为1369bp,我看许多文章里用这两个。但也有说用27F和1541R,测出来的片段能到1500bp。您一般用那一对引物啊?...

我一般都是27F 和1492,送测之后双向拼接结果比对。不过没遇到过你这种,有很多相似性百分百的。之前有人做菌种鉴定的时候都是16s序列连载体,用载体上的引物测序。因为通常测序获得的前后几十个碱基可能会不准。你也可以用1541试试,祝你好运!
6楼2020-01-03 18:58:46
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