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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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孙妙妙

金虫 (小有名气)

[求助] HPCL空针出现较大杂峰,求指教已有2人参与

各位虫友,本人最近做HPCL,用的C18柱,吸光值210nm, 流动相用的梯度,5min 甲醇:水=55:45, 10min 甲醇:水=75:25, 20min 甲醇=100,然后进空针的时候,在25min出现了一个很大的峰,各位虫友,甲醇的峰会这么高吗?还是柱子污染了?求指教,万分感谢。

HPCL空针出现较大杂峰,求指教
QQ图片20191214234114.jpg
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好好做实验!
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桑小晚

新虫 (小有名气)

2楼2019-12-15 06:55:16
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tcwzb168

新虫 (正式写手)

3楼2019-12-15 08:07:52
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ZHQJL

木虫 (正式写手)

hplc,你这个应该是杂峰,还有你这个检测波长是多少,甲醇截止波长190nm

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4楼2019-12-16 09:09:06
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天使的爱戴

木虫 (小有名气)

正常情况下不应该出这么大的峰,不过甲醇在210nm下本身有吸收。还有一个方法可以解决,换个牌子在走一下,看看是不是还有这么大的峰,如果还有,那基本上就是系统某处有污染了

发自小木虫IOS客户端
5楼2019-12-16 13:27:42
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lixiaoli5

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还是得多冲洗下色谱柱再试试,或者换其他色谱柱进空针,要是其他色谱柱没有25min峰,就说明你的这个色谱柱污染了,若其他色谱柱也有,就是仪器污染了,得冲洗仪器再试试
6楼2019-12-16 17:00:03
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10min就75%甲醇 了,应该不会那么高的峰。而且甲醇在210吸收没那么强。
这种应该首先怀疑是柱头或者进样针的污染,
另外你的本地空白有点高,需要用纯乙腈,或者加入一些异丙醇低流速,长时间冲洗下。
7楼2019-12-17 11:55:24
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明星爱学习

铜虫 (初入文坛)

8楼2019-12-19 17:56:58
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微笑123001

木虫 (著名写手)

如果是柱子没有冲洗干净,可以用甲酸洗几遍柱子,如果看到一个很大的峰出现,说明是柱子不干净 如果柱子干净,重新换一瓶甲醇流动相,走一遍,甲醇在210nm时是没有吸收的

发自小木虫Android客户端
9楼2019-12-28 17:11:18
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