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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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biosci

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 冬日暖阳 at 2019-12-11 11:07:10
我现在就想着把杂蛋白去掉就好了
...

换个思路,如果可以去除,就从基因组上吧杂蛋白基因敲除掉就好么,一劳永逸

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11楼2019-12-11 14:05:30
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冬日暖阳

新虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xueguangpu at 2019-12-11 13:48:45
如果结合核酸可以考虑用肝素柱进一步纯化。镍柱纯化的时候不用咪唑梯度浓度洗杂,一般用低浓度(10 mM)的溶液洗就可以了,如果有chaperone的话可以用高盐洗一下
...

结合核酸的话,我觉得可以加入核酸酶,离心除掉核酸。

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12楼2019-12-11 19:16:56
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冬日暖阳

新虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xueguangpu at 2019-12-11 13:48:45
如果结合核酸可以考虑用肝素柱进一步纯化。镍柱纯化的时候不用咪唑梯度浓度洗杂,一般用低浓度(10 mM)的溶液洗就可以了,如果有chaperone的话可以用高盐洗一下
...

我是初始挂样时,蛋白液里面就含有20mM的咪唑,所以再洗杂蛋白的时候,就直接用的20mM洗的,可惜还是没有洗下来

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13楼2019-12-11 19:19:39
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冬日暖阳

新虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xueguangpu at 2019-12-11 13:48:45
如果结合核酸可以考虑用肝素柱进一步纯化。镍柱纯化的时候不用咪唑梯度浓度洗杂,一般用低浓度(10 mM)的溶液洗就可以了,如果有chaperone的话可以用高盐洗一下
...

你看这个图,它在咪唑浓度高的时候,反而有些杂蛋白还多

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14楼2019-12-11 19:20:53
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xueguangpu

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 冬日暖阳 at 2019-12-11 12:16:56
结合核酸的话,我觉得可以加入核酸酶,离心除掉核酸。
...

我的意思是肝素柱能够结合核酸结合蛋白,如果用肝素柱纯化可以结合核酸的蛋白能够去除绝大部分的杂蛋白

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15楼2019-12-11 19:52:15
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xueguangpu

至尊木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★
冬日暖阳: 金币+5 2019-12-18 22:24:49
引用回帖:
14楼: Originally posted by 冬日暖阳 at 2019-12-11 12:20:53
你看这个图,它在咪唑浓度高的时候,反而有些杂蛋白还多
...

有的是非特异性结合柱填料,有的是可能与你的蛋白结合,有时候提高咪唑浓度并没有用

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16楼2019-12-11 19:53:52
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冬日暖阳

新虫 (正式写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by xueguangpu at 2019-12-11 19:53:52
有的是非特异性结合柱填料,有的是可能与你的蛋白结合,有时候提高咪唑浓度并没有用
...

哦,谢谢啦

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17楼2019-12-18 22:24:36
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我为谁狂

银虫 (小有名气)

换载体
哈哈哈哈
18楼2019-12-25 21:12:01
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FrdBio

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
http://www.friendbio.com/example/sid/38
19楼2019-12-31 11:28:56
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yanxiaomo

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这是不是PFU聚合酶啊??
20楼2019-12-31 15:19:53
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