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xydlengyue

金虫 (正式写手)

[交流] 关于双基因敲除的

想做一个双基因敲除的  第一个基因用的是自杀性质粒pre112进行同源重组来敲除的  现在如果要再敲除第二个基因 还能继续用这种方法吗 操作步骤  筛选方法都一样吗？ 来个大佬讲一下
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1楼2019-12-03 21:50:22
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xydlengyue

金虫 (正式写手)
顺便问一下 pre112敲出了一个基因会留下蔗糖耐受基因吗？因为我觉得最后一步双交换用蔗糖筛选
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3楼2019-12-03 22:20:04
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pl19940314

银虫 (正式写手)
★
xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
3楼: Originally posted by xydlengyue at 2019-12-03 22:20:04
顺便问一下 pre112敲出了一个基因会留下蔗糖耐受基因吗？因为我觉得最后一步双交换用蔗糖筛选

蔗糖耐受基因应该没有，这个自杀质粒好像是会溶解

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11楼2019-12-04 00:22:59
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
★
xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
如果完全敲除成功，不会有蔗糖sacBC残留，可以继续操作的

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12楼2019-12-04 08:47:55
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xydlengyue

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by pl19940314 at 2019-12-04 00:22:59
蔗糖耐受基因应该没有，这个自杀质粒好像是会溶解
...

请问就是说敲完了之后什么都不会留下来吗 就只是完成了敲除吗
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13楼2019-12-04 10:58:15
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xydlengyue

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by biosci at 2019-12-04 08:47:55
如果完全敲除成功，不会有蔗糖sacBC残留，可以继续操作的

请问就是什么多余序列都没有吗
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14楼2019-12-04 10:58:42
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gifted001

木虫 (著名写手)
★
xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
应该可以吧不同抗性质粒就可以

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15楼2019-12-04 12:28:57
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xydlengyue

金虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by gifted001 at 2019-12-04 12:28:57
应该可以吧不同抗性质粒就可以

那继续用这个质粒可以吗
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18楼2019-12-05 20:26:58
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喵咪在哪

新虫 (小有名气)
我们实验室一般来说都可以继续在原来基础上用同样方法敲，请问这个质粒可以共享一下吗？我最近也要用这个质粒敲。

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20楼2020-06-24 16:02:07
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MAIT

新虫 (小有名气)
★
xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
想问问单交换涂双抗板一般多久会长菌呀？两天了板子上一个也没有

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21楼2022-06-09 23:34:16
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hikingman2楼
2019-12-03 22:19   回复  
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xiaoqiuqiu204楼
2019-12-03 22:36   回复  
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solarzhao5楼
2019-12-03 23:12   回复  
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solarzhao6楼
2019-12-03 23:12   回复  
xiaoshuang17楼
2019-12-03 23:16   回复  
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tzynew8楼
2019-12-03 23:24   回复  
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马莹凯9楼
2019-12-03 23:26   回复  
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nono200910楼
2019-12-03 23:33   回复  
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sz_kebaoyuan16楼
2019-12-05 16:49   回复  
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BiotageAB17楼
2019-12-05 16:52   回复  
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psylhh19楼
2019-12-06 21:05   回复  
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