应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » CRISPRCas9基因敲除需要加入donor DNA吗
【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
81/1返回列表
查看: 1330  |  回复: 7
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者wxsj110将赠送您 20 个金币

wxsj110

新虫 (初入文坛)

[求助] CRISPRCas9基因敲除需要加入donor DNA吗已有2人参与

请问使用CRISPR Cas9进行基因敲除，DNA双链断裂后需要加入donor DNA吗。感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2019-09-23 09:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ELF1

新虫 (小有名气)
一般都是需要的

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2019-09-23 11:49:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-23 20:39:34
knockout一般不需要donor dna，knockin或者mutation需要修复模板进行同源重组。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wxsj110
2019更好更棒!
3楼2019-09-23 12:08:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxsj110

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2019-09-23 12:08:12
knockout一般不需要donor dna，knockin或者mutation需要修复模板进行同源重组。

谢谢!  我有一点不明白，基因敲除靶基因双链DNA断裂，不会自动复原吗，是如何造成靶基因被knockout的呢？
赞一下 回复此楼
4楼2019-09-23 14:54:25
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★ ★
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-23 20:39:51
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2019-09-23 16:07:37
 已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wxsj110 at 2019-09-23 14:54:25
谢谢!  我有一点不明白，基因敲除靶基因双链DNA断裂，不会自动复原吗，是如何造成靶基因被knockout的呢？...

如果不加donor dna（修复模板），双链断裂的DNA会进行非同源末端链接（NHEJ）的修复方式，有一定概率会引入insert或delete，这种变化会造成功能基因失活。
赞一下(1人) 回复此楼
2019更好更棒!
6楼2019-09-24 12:40:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小小香

新虫 (小有名气)
加同源重组片段更加靠谱

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2019-09-27 22:45:25
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我太秀了

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果是细胞系做knockout的话，不需要加入donor的，做Knockin或者mutation就需要的；如果是菌的基因编辑，一般都是需要加donor的
赞一下(1人) 回复此楼
专注细胞和微生物基因编辑知识分享
8楼2020-04-13 10:32:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxsj110 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫 SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[育儿交流] 小孩7岁，上一年级，不自信，学习较差 10+7 ljaxida 2024-04-16 36/1800 2024-04-20 07:19 by ljaxida
[考研] 298求调剂 +9 孙大大@ 2024-04-17 9/450 2024-04-19 21:50 by 刘国宁
[硕博家园] 哎 +5 s150535912 2024-04-18 6/300 2024-04-19 20:33 by s150535912
[高分子] 聚酰胺650与环氧树脂e44固化 +3 yindingxin 2024-04-15 3/150 2024-04-19 13:55 by weilingdun
[考博] 25申博记录贴 +3 我属驴核动力驴 2024-04-18 4/200 2024-04-19 10:53 by 安塔瓦拉多
[论文投稿] 发个文章，结果被某学报请的外审PUA了 +3 ziniu168 2024-04-18 8/400 2024-04-18 21:40 by xli1984
[基金申请] 国家资助博士后BC档出校后资助的概率多大？ +3 卡卡罗特哦 2024-04-16 3/150 2024-04-18 12:58 by wolfgangHugh
[考研] 求调剂化工学硕276 +14 星星陨落 2024-04-13 14/700 2024-04-17 22:57 by 华北刘兵
[论文投稿] MDPI初审7天，是不是被拒 20+6 applegirl5762 2024-04-15 8/400 2024-04-17 08:49 by bobvan
[基金申请] 请问教育部人文社科难度大吗 +9 锦衣卫寒战 2024-04-15 14/700 2024-04-16 23:10 by 锦衣卫寒战
[考研] 浙江海洋大学 船舶与海运学院 交通运输专硕 （交通信息工程及控制）接收调节 +4 joee 2024-04-15 8/400 2024-04-16 20:47 by TommyZiAng
[有机交流] 关于DMF +6 农药害害 2024-04-13 6/300 2024-04-16 15:57 by hwqMSE
[考研] 320求调剂 +5 陆志伟 2024-04-15 5/250 2024-04-16 11:11 by 19862091
[考研] 312求调剂 +3 Lauhalo 2024-04-15 3/150 2024-04-16 10:16 by 19862091
[考研] 296求调剂 +3 Cclocomotive 2024-04-16 4/200 2024-04-16 10:04 by 19862091
[考研] 334求调剂 +4 学药救人 2024-04-14 4/200 2024-04-15 15:05 by hunanzang
[考研] 322求调剂 +6 本己上岸 2024-04-15 7/350 2024-04-15 14:19 by mthwyj
[考研] 专硕调剂招生 +3 电致发光 2024-04-15 4/200 2024-04-15 07:34 by ashorewmj
[考研] 300求调剂 +5 @Xqy668800 2024-04-14 6/300 2024-04-14 23:03 by lincunhui
[考研] 323求调剂 +15 啊Q精神～ 2024-04-13 17/850 2024-04-14 12:44 by qjhawk
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭