24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 1675  |  回复: 16

Cherishqj

铜虫 (小有名气)

[求助] His标签蛋白不挂柱已有1人参与

纯化一个带HIS标签的重组蛋白但是不挂柱,怀疑是因为标签被包裹在内部了,所以尝试变性纯化,在lysis buffer和wash buffer中都添加8M尿素,然后纯化方式与非变性条件下的相同:菌体超声、离心得上清、上清过柱、wash buffer洗脱并收集,最后跑胶还是没有目的蛋白,请问我的变性纯化过程有什么问题吗?(补充说明,这是一个突变蛋白,其野生型可以通过镍柱纯化出来)
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
9楼2019-09-26 08:39:17
已阅   申请MicEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
普通回帖

Cherishqj

铜虫 (小有名气)

2楼2019-09-09 15:15:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cherishqj

铜虫 (小有名气)

还有一个问题,包涵体纯化和变性纯化有什么区别呢
3楼2019-09-09 15:36:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cherishqj

铜虫 (小有名气)

蹲,没有人吗
4楼2019-09-10 09:09:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wadecao

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2019-09-10 21:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ten1993

金虫 (小有名气)

westernn blot检测一下,或者浓缩洗脱液再跑PAGE,可能浓度不够。

发自小木虫IOS客户端
6楼2019-09-11 02:09:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybb1129

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
Cherishqj: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-09-26 21:16:59
我也遇到这问题,你可以尝试一下用蛋白纯化仪做一下

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2019-09-20 11:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


8楼2019-09-25 22:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ap372767129

铁虫 (正式写手)

你能确定你的蛋白表达了吗,很可能是没有表达才不挂柱的。
10楼2019-10-30 19:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Cherishqj 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 刚博士毕业,入职普通一本高校 +18 保持肌肤 2024-04-20 19/950 2024-04-25 18:30 by lyfbangong
[考博] 25年博士申请 +5 Changzixuan 2024-04-25 5/250 2024-04-25 17:37 by 那年的旧城
[考博] 求博导 +6 好okjh 2024-04-21 10/500 2024-04-25 14:04 by 好okjh
[硕博家园] 博士白读了 +37 Da_Meng_Zi 2024-04-21 41/2050 2024-04-25 14:02 by 瞬变2015
[硕博家园] 聊天 +11 暮色恋伊人 2024-04-22 12/600 2024-04-25 13:53 by UCTS
[基金申请] 国社科项目,你们学校都限额申报吗? +7 屡战屡败 2024-04-21 10/500 2024-04-25 12:10 by 屡战屡败
[电化学] 耗材发问 +4 Happy C 2024-04-22 4/200 2024-04-25 11:03 by 普通小虫
[基金申请] 前同事拿我以前未中的国自然标书申请今年的国自然,现在基金委发来调查函 +33 bjdxyxy 2024-04-19 53/2650 2024-04-25 08:05 by 大雁高飞
[考研] 0854-0855调剂 +7 shangannum1 2024-04-21 10/500 2024-04-25 01:31 by 啊廖sh
[考研] 博士生招生!! +5 2458827884 2024-04-19 5/250 2024-04-24 22:28 by 不懂的风清
[访问学者] CSC的访问学者申请,没有个评审意见,也不知道怎么改,还有必要申请吗 +4 flyingship 2024-04-20 4/200 2024-04-24 21:09 by 59038mute
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +9 wangyp123 2024-04-23 11/550 2024-04-24 19:01 by bangbangbiu
[论文投稿] 期刊推荐 20+4 木颜尘ip 2024-04-22 7/350 2024-04-24 10:06 by bobvan
[教师之家] 找工作过程中碰到好多人问南京某新换校长211的政策,规定如下 +15 ZHONGWU_U 2024-04-21 17/850 2024-04-24 05:12 by juta256
[公派出国] 東京大学 应用化学专业柳田研究室 招收修士/博士生 +5 蝶梦123 2024-04-19 5/250 2024-04-23 22:40 by 90472jvvh
[论文投稿] 无under review,直接DIP,咋么办。 +10 lizhengke06 2024-04-19 16/800 2024-04-23 19:15 by 化学程序员
[教师之家] 发现督导在听课,需要跟TA招呼示意吗?有同学看手机、课件有疏漏算大问题吗? +11 河西夜郎 2024-04-19 11/550 2024-04-23 15:01 by mylifecg
[考博] 研二光催化6月底4篇2区 +7 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-23 06:59 by byron2012
[考博] 青岛科技大学顾玉超教授课题组招收博士生 +3 yanqingwang 2024-04-19 3/150 2024-04-22 15:21 by 理科生yes
[论文投稿] 研究光催化的,好中的三四区 20+3 sl.0117 2024-04-20 3/150 2024-04-22 09:53 by bobvan
信息提示
请填处理意见