应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？
【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
51/1返回列表
查看: 2520  |  回复: 4
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者菱霖飞飞飞将赠送您 5 个金币

菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)

[求助] GST标签融合蛋白纯化所用的binding buffer以及elution buffer中DTT如何加？

GST纯化柱的protocol中显示的结合缓冲液为PBS，洗脱缓冲液则为pH=8.0 50mM Tris-HCl +10mM 还原型谷胱甘肽。
        其中，注意事项原文是这么说的：结合缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。这句话意思是说结合缓冲液或者洗脱缓冲液两者选其一加DTT吗？，若只在洗脱缓冲液中加DTT，会不会对还原性谷胱甘肽有影响？大家这种情况下一般是怎么使用DTT的呢？
        另外，洗脱缓冲液可以由tris-hcl改为在PBS中加入10mM 还原型谷胱甘肽吗？因为用tris-hcl作储存液纯化得到的蛋白做EMSA实验结合不是很明显。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2019-08-19 11:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夺命十三幺

新虫 (小有名气)
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2019-08-25 12:24:06
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菱霖飞飞飞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 夺命十三幺 at 2019-08-25 12:24:06
请问你的GST标签切除了吗，我用的TEV酶一点也切不下来

我没切，您知道我的这个问题中DTT在哪种溶液中加入吗？
赞一下 回复此楼
3楼2019-08-26 10:19:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夺命十三幺

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 菱霖飞飞飞 at 2019-08-26 10:19:15
我没切，您知道我的这个问题中DTT在哪种溶液中加入吗？...

我是在两种Buffer中都加了 这个应该没有影响

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-08-26 14:37:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DrawWon

新虫 (初入文坛)
您好，您换用PBS作储存液做EMSA了么？效果咋样。
赞一下 回复此楼
5楼2022-01-17 11:12:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 菱霖飞飞飞 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫 论文翻译-EnPapers美助理教授团队-SCI英文润色
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 博士招生 +3 zx179 2024-04-24 6/300 2024-04-24 12:09 by zx179
[硕博家园] 考研，求职还是考编? +11 xizj 2024-04-21 19/950 2024-04-24 10:36 by 肯德基到家
[教师之家] 博士论文被抄袭 +19 和尚敲小木鱼 2024-04-22 31/1550 2024-04-24 09:09 by Xiaolin81
[教师之家] 国内科研环境差导致国内科研水平差的根源 +9 zju2000 2024-04-18 10/500 2024-04-24 09:09 by ckxbear
[考博] 申博成果界定是根据Jcr分区还是中科院分区 +4 我属驴核动力驴 2024-04-22 5/250 2024-04-24 08:47 by 晓目崇
[公派出国] 東京大学 应用化学专业柳田研究室 招收修士/博士生 +5 蝶梦123 2024-04-19 5/250 2024-04-23 22:40 by 90472jvvh
[找工作] 工作问题求助 +3 向前?@ 2024-04-18 5/250 2024-04-23 21:25 by 向前?@
[论文投稿] 无under review，直接DIP，咋么办。 +10 lizhengke06 2024-04-19 16/800 2024-04-23 19:15 by 化学程序员
[有机交流] 紧急求助，有谁用过三甲基硅醇钾TMSOK吗？ 1000+3 genius2008 2024-04-19 8/400 2024-04-23 16:57 by czyzsu
[考博] 博士申请 +4 zhangxm0525 2024-04-17 12/600 2024-04-23 16:35 by 莹亮的星空
[硕博家园] 哎 +8 s150535912 2024-04-18 9/450 2024-04-23 15:48 by huixiong0627
[论文投稿] 国家重点研发计划论文可以发MDPI里的期刊吗 +6 lin_2018 2024-04-17 6/300 2024-04-22 17:32 by 20094958
[考博] 青岛科技大学顾玉超教授课题组招收博士生 +3 yanqingwang 2024-04-19 3/150 2024-04-22 15:21 by 理科生yes
[访问学者] CSC的访问学者申请，没有个评审意见，也不知道怎么改，还有必要申请吗 +3 flyingship 2024-04-20 3/150 2024-04-22 13:52 by louistom_521
[找工作] 化工专业 10+3 xiao太阳94 2024-04-18 7/350 2024-04-22 13:48 by mlnjut
[论文投稿] 编辑是选国外的好还是国内的好。 +8 lizhengke06 2024-04-20 8/400 2024-04-22 08:58 by cuiyunjian
[论文投稿] 一审一个审稿人，小修，会怎么样呀？ +10 林师妹 2024-04-18 10/500 2024-04-20 18:08 by 肖虫家
[基金申请] 国自然青年基金只有一篇能第一标注，其他都是第二标注能结题吗？ 10+4 lice_1987 2024-04-18 6/300 2024-04-19 08:29 by kudofaye
[论文投稿] 发个文章，结果被某学报请的外审PUA了 +3 ziniu168 2024-04-18 8/400 2024-04-18 21:40 by xli1984
[论文投稿] 投稿求助 5+3 我是洲洲啊 2024-04-17 5/250 2024-04-18 17:13 by topedit
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭