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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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糖豆媛

捐助贵宾 (初入文坛)

[求助] TMB显色反应

大家好，我在做TMB类过氧化物酶催化的实验。TMB用无水乙醇溶解，H2O2做了10mM,5mM,2.5mM的浓度梯度，类过氧化物酶做了20，10，5维克的浓度梯度，TMB的终浓度0.5-1mM,缓冲液为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，去离子水配置，PH试了3.0，3.5，4.0，4.5，7，反应温度试了室温，水浴30度，水浴45度，但是显色都不理想，显色时间10小时左右，颜色还是很淡，淡蓝色。求助大家，是什么原因？
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1楼2019-07-07 17:13:09
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周先森z

新虫 (小有名气)
酶是自己做的吗？是不是催化效果不太理想，含量也少，我最近也在做TMB显色实验

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2楼2019-07-08 08:02:35
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糖豆媛

捐助贵宾 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 周先森z at 2019-07-08 08:02:35
酶是自己做的吗？是不是催化效果不太理想，含量也少，我最近也在做TMB显色实验

这个材料已经有很多文献报道了，文献上显色时间很短5-15min，颜色也很深，但是我就是一直做不出来，不知道为什么
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3楼2019-07-08 11:28:40
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xxsyzygz

金虫 (小有名气)
试试调节酶的量
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4楼2019-07-17 11:16:27
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小白来转转

木虫 (小有名气)
可以用HRP做一遍，试试条件，再换成你的类酶

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5楼2020-06-19 18:26:35
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gzw信仰

新虫 (初入文坛)
楼主发现了问题在哪里了吗？最近也遇到了这样的问题

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6楼2020-11-10 17:06:25
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无辣不欢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gzw信仰 at 2020-11-10 17:06:25
楼主发现了问题在哪里了吗？最近也遇到了这样的问题

同样的问题
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7楼2020-12-08 19:05:05
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W m x

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 无辣不欢 at 2020-12-08 19:05:05
同样的问题...

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8楼2020-12-21 01:39:36
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