| 查看: 3068 | 回复: 6 | |||
| 【奖励】 本帖被评价5次，作者jidou324增加金币 4 个 | |||
[资源]
【视频+文字资料】细胞培养关键事项
|
|||
资料部分展示： 1.png  2.png  3.png 关键事项详解： 1.如何选用培养基？【资源文末领取，仅为学习所用~】 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在mem中培养的细胞，很可能在dmem或m199中同样很容易生长。总之，首选mem做粘附细胞培养、rpmi-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是aim v培养基（sfm）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件： 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 mem, 10% 热灭活马血清 3t6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 dmem, 10% 胎牛血清 a549 上皮细胞 人 肺癌 f-12k, 10%胎牛血清 a9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 dmem, 10%胎牛血清 att-20 上皮细胞 小鼠 垂体肿瘤 f-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 balb/3t3 成纤维细胞 小鼠 胚胎 dmem, 10% 胎牛血清 bhk-21 成纤维细胞 仓鼠 肾 gmem, 10% 胎牛血清 或mem, 10% 胎牛血清 和neaa bhl-100 上皮细胞 人 乳房 mccoy'5a, 10% 胎牛血清 bt 成纤维细胞 牛 鼻甲骨细胞 mem, 10% 胎牛血清 和 neaa caco-2 上皮细胞 人 结肠腺癌 mem, 20% 胎牛血清 和neaa chang 上皮细胞 人 肝脏 bme, 10% 小牛血清 cho-k1 上皮细胞 仓鼠 卵巢 f-12, 10% 胎牛血清 clone 9 上皮细胞 大鼠 肝脏 f-12k, 10% 胎牛血清 clone m-3 上皮细胞 小鼠 黑素瘤 f-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 cos-1 成纤维细胞 猴 肾 dmem, 10% 胎牛血清 cos-3 成纤维细胞 猴 肾 dmem, 10% 胎牛血清 cos-7 成纤维细胞 猴 肾 dmem, 10% 胎牛血清 crfk 上皮细胞 猫 肾 mem, 10% 胎牛血清 和neaa cv-1 成纤维细胞 猴 肾 mem, 10% 胎牛血清 d-17 上皮细胞 狗 骨肉瘤 mem, 10% 胎牛血清 和neaa daudi 成淋巴细胞 人 淋巴瘤病人血液 rpmi-1640, 10% 胎牛血清 gh1 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 f-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 gh3 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 f-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 h9 成淋巴细胞 人 t细胞淋巴瘤 rpmi-1640, 20% 胎牛血清 hak 上皮细胞 仓鼠 肾 bme, 10% 小牛血清 hct-15 上皮细胞 人 结肠直肠腺癌 rpmi-1640, 10% 胎牛血清 hela 上皮细胞 人 子宫颈癌 mem, 10% 胎牛血清 和neaa (in suspension, s-mem) hep-2 上皮细胞 人 喉 癌 mem, 10% 胎牛血清 hl-60 成淋巴细胞 人 早幼粒细胞白血病 rpmi-1640, 20% 胎牛血清 ht-1080 上皮细胞 人 纤维肉瘤 mem, 10% hi 胎牛血清 和neaa ht-29 上皮细胞 人 结肠腺癌 mccoy's 5a, 10% 胎牛血清 huvec 内皮细胞 人 脐带 f-12k, 10% 胎牛血清 和 肝素盐 100 ug/ ml i-10 上皮细胞 小鼠 睾丸癌 f-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 im-9 成淋巴细胞 人 骨髓瘤病人骨髓 rpmi-1640, 10% 胎牛血清 jeg-2 上皮细胞 人 绒毛膜癌 mem, 10% 胎牛血清 jensen 成纤维细胞 大鼠 肉瘤 mccoy's 5a, 5% 胎牛血清 jurkat 成淋巴细胞 人 淋巴瘤 rpmi-1640, 10% 胎牛血清 k-562 成淋巴细胞 人 骨髓性的白血病 rpmi-1640, 10% 胎牛血清 kb 上皮细胞 人 口腔癌 mem, 10% 胎牛血清 和neaa kg-1 骨髓白细胞 人 红白血病病人骨髓 imdm, 20% 胎牛血清 l2 上皮细胞 大鼠 肺 f-12k, 10%胎牛血清 l6 大鼠 骨骼肌成肌细胞 dmem, 10% 胎牛血清 llc-wrc 256 上皮细胞 大鼠 癌 medium 199, 5% 马血清 mccoy 成纤维细胞 小鼠 未知 mem, 10% 胎牛血清 mcf7 上皮细胞 人 乳腺癌 mem, 10% 胎牛血清 neaa, 10ug/ml 胰岛素 wehi-3b 类巨噬细胞 小鼠 骨髓单核细胞白血病 dmem, 10% 胎牛血清 wi-38 上皮细胞 人 胚胎肺 bme, 10% 胎牛血清 wish 上皮细胞 人 羊膜 bme, 10% 胎牛血清 ws1 人 胚胎皮肤 mem, 10% 胎牛血清 和neaa xc 上皮细胞 大鼠 肉瘤 mem, 10% 胎牛血清 和neaa y-1 上皮细胞 小鼠 肾上腺瘤 f-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 2.为什么要热灭活血清？ 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养es细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 3.l－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？ l－谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，l－谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。l－谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终确定。l－谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。 4.glutamax-i是什么？培养细胞如何利用glutamax-i？这个二肽有多稳定？ glutamax-i二肽是l－谷氨酰胺的衍生物，将其不稳定的α－氨基用l－丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放l－谷氨酰胺供利用。 glutamax-i二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，glutamax-i二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，l－谷氨酰胺几乎完全降解。 5.为什么培养基中可以省去加酚红？ 酚红在培养基中被用来作为ph值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。 6.如何用台盼兰计数活细胞？ 用无血清培养基把细胞悬液稀释到200－2000个/毫升，在0.1毫升的细胞中加入0.1毫升的0.4％的台盼兰溶液。轻轻混匀，数分钟后，用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰，因而染成蓝色的细胞是死细胞。 7.如何消除组织培养的污染？ 当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查hepa过滤器。 高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素b和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。 |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：libolin3@tal.com - 附件 1 : 细胞培养资源（视频+文本）.docx
2019-06-18 14:45:11, 64.06 K
» 收录本帖的淘贴专辑推荐
 工作 |
» 猜你喜欢
10043以后咋出去啊
已经有3人回复
-
两类问题算是白选了~
已经有13人回复
-
25年博士申请
已经有12人回复
-
博士论文被抄袭
已经有43人回复
-
"颜宁:基础研究应顶天立地"能做到基础研究同时顶天立地的才是牛人
已经有6人回复
-
大学直属学院卸任的副院长退休后还享受副处级的养老待遇吗？
已经有4人回复
-
投稿RSC旗下杂志突然间看不到投稿状态，里面投稿的文章信息不见了，有遇到过的吗？
已经有3人回复
-
求论文投稿期刊推荐
已经有4人回复
-
AC审稿
已经有6人回复
-
聊天
已经有13人回复
2楼2019-06-19 06:40:11
简单回复
z虾米3楼
2019-08-22 10:22
回复
五星好评 顶一下，感谢分享！
2019-08-22 13:46
回复
五星好评 顶一下，感谢分享！
2019-09-27 08:45
回复
五星好评 顶一下，感谢分享！
juinia6楼
2020-06-15 11:27
回复
五星好评 顶一下，感谢分享！
dm稻米7楼
2023-05-05 16:12
回复
五星好评 顶一下，感谢分享！
15