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15052123882

新虫 (初入文坛)

[交流] 新入手的分子,想请教下大家已有3人参与

我想在下游引物中加上终止密码子和his标签,我应该怎么加?
我设计的下游引物:酶切位点保护碱基+酶切位点+TAA+CATCATCATCATCATCAT+基因下游的特异性引物(5'—3'),想问下大家这样设计下游引物加的终止密码子和组氨酸标签序列有问题吗?

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15052123882

新虫 (初入文坛)

拜托了,大家,刚入分子问的问题比较低级

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2楼2019-05-23 22:38:35
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chenpp2006

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:50:29
his序列如果在下游引物中要用互补序列

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3楼2019-05-24 03:38:49
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junjieshao

铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:50:38
先设计正向从5‘-3’, 然后用软件来个反向互补就行了,直接设计反向互补要头昏。
比如:
5‘-3’末端正向序列(去掉终止子),加上his序列(加上终止子),加上酶切,保护,然后来个逆反。
4楼2019-05-24 05:25:08
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大-木-虫

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-05-25 22:50:48
加标签得把终止密码子去掉啊,你要是不去掉加上标签还有什么用呢?
5楼2019-05-24 08:30:08
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