| 查看: 631 | 回复: 0 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者GRIT。将赠送您 5 个金币 | ||
[求助]
最近稻米蛋白的电泳一直跑不出来，不知哪里步骤出了问题，求大神指教。
|
||
说一下我的步骤。1，分离胶12%，浓缩胶4%。胶的制备可以确定没问题。2，样品处理：提蛋白时用的是碱溶酸沉法，稻米已脱脂。称取自己提的稻米蛋白1mg以后用1mlPBS稀释。测样品蛋白浓度，显示所提蛋白杂质含量较高，大概在1.5mg/lml左右。短离心，煮沸10分钟，再10000转离心10min。上样量分别加了10ul，5ul。3，电泳：电流开始样品在浓缩胶时是10mA，进入分离胶后改为25mA。4，染色。脱色。最后出现分离胶上只有三个条带而且非常模糊。求大神指教！ 问题：1，怎么解决蛋白杂质含量高的问题？2，为什么有蛋白浓度，却跑不出清晰的电泳条带？ 感谢大神们。  微信图片_20190521101744.jpg@hc-material |
回复此楼» 猜你喜欢
前同事拿我以前未中的国自然标书申请今年的国自然，现在基金委发来调查函
已经有7人回复
-
无under review，直接DIP，咋么办。
已经有7人回复
-
申请24博士 材料/化工/环境
已经有4人回复
-
一审一个审稿人，小修，会怎么样呀？
已经有9人回复
-
最近遇到这样一个问题
已经有10人回复
-
小孩7岁，上一年级，不自信，学习较差
已经有34人回复
-
家乡二本高校/沿海传统私企，如何抉择？
已经有14人回复
-
某系主任被同校教授举报包养情妇、长期嫖娼
已经有17人回复
-
找一个允许我去清华联合培养的研究生导师
已经有14人回复
-
考研英语带学
已经有6人回复
15