| 查看: 418 | 回复: 1 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者分子-黄雁将赠送您 5 个金币 | ||
[求助]
采用电转化的方法构建革兰式阴性菌缺失突变株的回补株
|
||
|
我目前在做革兰式阴性菌缺失突变株的回补株构建，采用的是电转化方法。 选取OD600为2.1时制备感受态细胞，此时菌体出于对数前中期。立即冰预30 min，之后无菌水洗两遍，10％甘油洗两遍，最后GYT重悬稀释至OD为1.1。 电转化。第一次，40ul感受态细胞加入140ng质粒，电压1.25 kv、600Ω、25uF；第二次，40ul感受态细胞加入100ng重组质粒，电压1.5kv、200Ω、25uF；第三次，40ul感受态细胞加入66ng重组质粒，电压2.0kv、200Ω、25uF。均为成功，且涂平板后菌量呈递增趋势。亦不明原因。 无论从哪个方面，希望大家能给出些建议，不胜感激。 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
负载率计算
已经有0人回复
-
球磨纳米粒子条件
已经有6人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有264人回复
-
球磨分散剂
已经有4人回复
-
阴阳离子交换剂！！！！
已经有3人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有9人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
2楼2019-05-20 19:33:50
50