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JOMI

新虫 (初入文坛)

[交流] 是模板问题,还是操作问题已有5人参与

我前几天提取的rna,测了浓度在3000-4000左右,电泳图如下。提的rna蛋白污染很小,但是盐污染严重,我用rna做逆转录,得到的cDNA为模板,为了验证我得到的模板质量,我用同实验室其他人已经p出来的基因做电泳,我还是没有跑出条带,而且我的电泳图在胶孔处有明显的亮带,不存在目的基因比marker大的问题,我怀疑我操作有问题,昨天同实验室的帮我又做了一次逆转录,我用他做出来的cDNA做模板去p别人已经p出来的基因,还是没有条带,而且还是胶孔处有明显亮带,别人都没有遇到我这种情况,到底是怎么回事,我的操作问题吗?万能的小虫友们,帮帮我吧

是模板问题,还是操作问题


是模板问题,还是操作问题-1


是模板问题,还是操作问题-2


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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

电泳质量不行啊

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2楼2019-05-18 07:03:41
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大-木-虫

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
RNA提的不错,换一个内参基因重新做一下。理论上反转录不会出问题的
3楼2019-05-18 08:28:50
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hesu1105

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
盐污染严重怎么不洗呢

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相信我最后一定能成功
4楼2019-05-18 14:52:56
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MAS_rice

铁杆木虫 (正式写手)

竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
5楼2019-05-20 01:42:54
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JOMI

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by MAS_rice at 2019-05-20 01:42:54
把cDNA稀释做PCR

我稀释了两倍,还是做不出来

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6楼2019-05-20 12:30:46
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JOMI

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hesu1105 at 2019-05-18 14:52:56
盐污染严重怎么不洗呢

洗了,我用75%的乙醇洗了四次,就是干燥的时候,乙醇好像没弄太干净

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7楼2019-05-20 12:31:37
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JOMI

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopyzxx at 2019-05-18 07:03:41
电泳质量不行啊

三个条带啊,大神,是提取的rna不能用吗

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8楼2019-05-20 12:32:26
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JOMI

新虫 (初入文坛)

emuch: 屏蔽内容, 违规存档, 违规发布联系方式 2019-05-20 19:16:39
本帖内容被屏蔽

9楼2019-05-20 12:33:17
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hesu1105

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
什么叫已经p出来的基因,你们提rna所用的材料一样吗?

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相信我最后一定能成功
10楼2019-05-20 15:45:07
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