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木叶林森

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于荧光定量结果分析已有2人参与

qPCR的结果可以直接用目的基因Ct值-内参Ct值这样来分析吗?还是必须得用2-ΔΔCт 值?我做了两组样品的荧光定量,结果,目的基因Ct值-内参Ct值的差别不大,但2-ΔΔCт 就有差异了,请问我该用哪个?而且为什么会出现这种差异?

关于荧光定量结果分析
delta Ct.jpg


关于荧光定量结果分析-1
RQ.jpg
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独孤蚕

铁杆木虫 (著名写手)

我们要比较的是初始表达量,而不是循环圈数。

发自小木虫Android客户端
2楼2019-03-14 07:39:09
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木叶林森

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 独孤蚕 at 2019-03-14 07:39:09
我们要比较的是初始表达量,而不是循环圈数。

什么意思?

发自小木虫Android客户端
3楼2019-03-15 15:44:40
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董红红

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定是用2-ΔΔCт 值,直接用目的基因的Ct-内参基因的Ct值是不能反映基因的表达水平的。

发自小木虫IOS客户端
4楼2019-03-15 20:40:12
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素荏樣

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

2^-ΔCt意义是目标基因与看家基因的比值,说明你的内参基因表达量比目标基因多很多。2^-ΔΔCt意义是实验组的目标基因和对照组的目标基因之间的比值,也就是说实验组的表达倍数。
虽然数值不一样但是倍数关系是不变的。

发自小木虫Android客户端
5楼2019-04-13 09:24:46
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一路芳妃

新虫 (初入文坛)

请问楼主,柱状图的误差线是用哪个数据做出来的呢?是三个生物学重复2^-ΔΔCт值之间的误差嘛?
6楼2019-05-14 14:13:06
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zai4109

新虫 (正式写手)

7楼2019-06-01 10:53:58
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