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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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圈圈圆圆吧啦

银虫 (正式写手)

[求助] 慢病毒转导NK细胞和T细胞,GFP能够表达,但是目的基因不表达是什么原因?已有1人参与

慢病毒转导NK细胞和T细胞,质粒载体中有P2A原件,GFP能够表达,但是目的基因不表达是什么原因?序列测序了没有问题。有知道的大神能否提供一些经验啊?
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筚路蓝缕。
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2011sp

铁杆木虫 (著名写手)

是你检测方法有问题吧!

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2019-02-20 07:06:09
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ATGC_gogo

铁虫 (初入文坛)

表达量太少,没检测到?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2019-02-20 09:28:07
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圈圈圆圆吧啦

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2011sp at 2019-02-20 07:06:09
是你检测方法有问题吧!

流式和荧光显微镜都看了,对照的仅有GFP的对照组,有很强的荧光信号,但是实验组不行。

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筚路蓝缕。
4楼2019-02-20 16:34:22
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圈圈圆圆吧啦

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by ATGC_gogo at 2019-02-20 09:28:07
表达量太少,没检测到?

对照组(GFP对照质粒荧光强度很好)一样处理的,但是目的基因就是不表达。

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筚路蓝缕。
5楼2019-02-20 16:36:18
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1039089967

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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圈圈圆圆吧啦: 金币+5, 有帮助 2019-02-20 20:55:31
注意有没有移码突变,或有终止密码子。

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6楼2019-02-20 19:35:26
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圈圈圆圆吧啦

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1039089967 at 2019-02-20 19:35:26
注意有没有移码突变,或有终止密码子。

序列测序过,未有发现突变.您觉得有必要再重新克隆一下吗?
筚路蓝缕。
7楼2019-02-20 20:55:18
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hyk1990

新虫 (小有名气)

请教一下,你慢病毒转导NK细胞效率如何
8楼2019-07-24 17:24:11
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