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生物海

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问一个宿主可以插入两种载体吗已有1人参与

大家好,我最近做实验需要在同一个宿主里转进两个质粒,一个是插入一段启动子序列的pUC19高拷贝载体,另一个是适合表达蛋白的pET28a载体,请问一个宿主里可以转进两个载体吗,有什么要注意的吗?细菌会根据对ori的偏好性而选择复制一个载体而不复制另一个吗,蛋白表达会受到影响吗?有大神能指导一下吗,谢谢!
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donkey2017

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
生物海: 金币+20, ★★★很有帮助 2019-01-09 17:02:36
质粒上的复制子要不一样才可以,pUC19和PET28a复制子都是一样的,所以不行,可以尝试用Duet系列的
3楼2019-01-09 14:04:22
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biosci

捐助贵宾 (著名写手)


可以转入两种质粒,但是puc19载体和pet28a载体不兼容

发自小木虫Android客户端
2楼2019-01-08 22:23:37
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biosci

捐助贵宾 (著名写手)



西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-02-14 20:34:52
pbad和pacyc都可以

发自小木虫Android客户端
6楼2019-01-10 11:30:02
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普通回帖

生物海

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by donkey2017 at 2019-01-09 14:04:22
质粒上的复制子要不一样才可以,pUC19和PET28a复制子都是一样的,所以不行,可以尝试用Duet系列的

谢谢大神,我还想问一下如果我把PET28a换成其他适合表达蛋白的载体的话选择哪种载体好?
我查了一下pDuet系列的载体是可以同是表达两种基因的载体,您是建议我直接用pDuet表达两个基因吗?它的拷贝数应该不会很高吧,但是我想得到高拷贝的启动子序列
4楼2019-01-09 16:55:13
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生物海

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-01-08 22:23:37
可以转入两种质粒,但是puc19载体和pet28a载体不兼容

你好,那请问有哪些质粒可以和pUC19兼容,还适合表达蛋白呢?谢谢!
5楼2019-01-10 10:24:12
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生物海

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by biosci at 2019-01-10 11:30:02
pbad和pacyc都可以

谢谢大神,我已经借到pbad-33了
7楼2019-01-10 22:15:20
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werq63

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-02-14 20:34:39
两种抗性不一样,应该可以,用双抗培养
8楼2019-02-13 11:26:47
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shuqi123

铜虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-02-14 20:34:26
一般来说是可以的,不过需要分别并且对应适应才可以注入宿主
实验室小玩家 MY QQ 3150890351
9楼2019-02-14 09:16:48
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wwwzrq

金虫 (小有名气)

经常用pet21和pet28共转表达,没有问题
10楼2019-02-23 13:28:42
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