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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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xiao1109

金虫 (初入文坛)

[求助] 关于CRISPR/CAS9的转染效率问题已有4人参与

最近在做肿瘤细胞基因敲除实验，用的CRISPR，构建好质粒后转染效率总是很低，大多数细胞转染后都死了，有经验人士一起交流一下嘛？十分感谢
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加油
1楼2018-12-27 08:52:44
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么载体？转染什么细胞？用什么转染？转了多少质粒？
最好把问题描述的清楚一点别人才能帮到你。
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2019更好更棒!
2楼2018-12-28 19:54:47
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小青青蛙

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

什么载体？转染什么细胞？用什么转染？转了多少质粒？
最好把问题描述的清楚一点别人才能帮到你。

我现在都直接转Cas9蛋白进细胞，脱靶率大大降低，推荐用这个方法。现在很多文献都开始用转蛋白的方法做基因编辑。

推荐一个做基因编辑蛋白挺全的厂家，我用的cas9蛋白通常找他们：
https://www.biomart.cn/63867/index.htm
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3楼2019-01-10 11:15:19
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tongbujing

禁言 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
4楼2019-06-16 16:22:22
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源井生物b

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果质粒浓度调配最佳，脂质体已经用最好的；可能重点观察一下细胞状态；其余还需要详细洽谈才知道如何调整情况。
赞一下 回复此楼
https://www.ubigene.com/
5楼2021-01-21 14:10:38
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