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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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originalWh

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序的问题，求助

送测菌液，共三个样，都在1000bp左右，PCR检测到目的条带，送测序BGH都测的没有问题，也有我的目的条带。但是三个样T7都测失败了，想请问一下大佬问可能是什么原因。
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1楼2018-12-27 01:39:38
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La Vida

新虫 (小有名气)
★ ★
drwhoknowss: 金币+2, 鼓励交流 2018-12-27 11:49:07
有可能是质粒T7序列处结构被破坏，或者出现了突变，导致T7测序引物没法正常工作。不知道你PCR检测的时候用的是什么引物？载体是哪个？你可以试试用T7和你的片段引物进行PCR，看是否能扩出条带。如果不行，那可能就是质粒T7部分有问题。或者你还可以从片段中拉一段引物作为测序引物往T7方向测，看看T7处是否正常

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2楼2018-12-27 02:04:06
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originalWh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by La Vida at 2018-12-27 02:04:06
有可能是质粒T7序列处结构被破坏，或者出现了突变，导致T7测序引物没法正常工作。不知道你PCR检测的时候用的是什么引物？载体是哪个？你可以试试用T7和你的片段引物进行PCR，看是否能扩出条带。如果不行，那可能就是 ...

谢谢，打算先单向测通看一下
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3楼2018-12-27 02:09:08
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梁可以

新虫 (初入文坛)
想问最后怎么解决的

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4楼2022-12-11 13:21:32
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