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15966637269

新虫 (初入文坛)

[求助] 目的片段与载体

目的片段与载体连接一直连不上,请问有哪位大神可以指点

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凉雨,滴

新虫 (正式写手)

你这问题类似于我上不了天,请大神指点,没图没描述,怎么解决

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2楼2018-12-20 10:44:03
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15966637269

新虫 (初入文坛)

PCR片段BamH I酶切纯化,条带大小1500bp,枯草质粒BamH I+ Sma I酶切纯化,大小5200bp,但片段条带亮度比载体要亮很多

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3楼2018-12-20 11:09:57
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DAVIBIO

新虫 (初入文坛)

酶切时间不够,酶失活,双酶切还是单酶切,很多环节会出错

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4楼2018-12-20 18:25:30
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草哥cium

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 15966637269 at 2018-12-20 11:09:57
PCR片段BamH I酶切纯化,条带大小1500bp,枯草质粒BamH I+ Sma I酶切纯化,大小5200bp,但片段条带亮度比载体要亮很多

为什么PCR产物要单酶切,载体却双酶切

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5楼2018-12-20 19:05:52
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shier-

新虫 (初入文坛)

我也是连接之后涂板不长菌,然后就在连接之后跑胶了,一看确实没有连接上!请问楼主找到方法了吗?

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6楼2019-03-17 15:00:14
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