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梅雪芳新虫 (小有名气)
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关于COIP
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我们这边想做某个杂蛋白ESP与细胞中的蛋白DNMT/TET的相互作用，想知道这个杂蛋白ESP中的哪些成分能与细胞中的蛋白DNMT/TET相互作用，计划用COIP-MS的方法。 目前的做法是，做了杂蛋白ESP的多克隆抗体（兔IgG），买了蛋白DNMT/TET的商品化抗体。将杂蛋白ESP与细胞作用48h后，做coip。洗脱后，用杂蛋白ESP的多克隆抗体做WB验证，发现没有特异性条带，故没有进一步质谱分析。 请问这种情况会是什么问题呢？原代细胞？杂蛋白多抗的问题？蛋白与细胞作用时间太长了？ 还是说根本就没有结合？ 这种情况有没有什么解决方案，或者应该用什么方法验证一下呢？ 以下是两次COIP的结果，没有看到特异性条带  coip.jpg  coip2.jpg |
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rohdy
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