【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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Yzm0909

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求大牛帮助,酶切类!万分感谢!已有6人参与

做的50ul体系单酶切,一个是快切酶,切了半小时,一个是普通的酶,切了两个半小时,泳道1是marker,2是未切质粒,3是切过的质粒,4是未切PCR胶回收产物,5是切过的PCR胶回收产物,结果泳道5什么都没了,是什么原因呢?然后怎么解决呢?求大家帮助下,谢谢1

求大牛帮助,酶切类!万分感谢!
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lizimu566

木虫 (正式写手)

那就重新切呗
2楼2018-10-23 08:53:50
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KM石头

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
渊博震天: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-10-23 11:19:30
PCR产物使用PCR产物纯化试剂盒回收,再双酶切后跑胶回收,这样会浓度会高一点
3楼2018-10-23 11:12:35
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Yzm0909

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lizimu566 at 2018-10-23 08:53:50
那就重新切呗

重新切,不是没找到病灶,不还这样么
4楼2018-10-23 11:13:24
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lizimu566

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by Yzm0909 at 2018-10-23 11:13:24
重新切,不是没找到病灶,不还这样么...

重复一下看看能不能重现这种结果啊
5楼2018-10-24 17:32:31
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不问来路

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-27 19:45:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by KM石头 at 2018-10-23 11:12:35
PCR产物使用PCR产物纯化试剂盒回收,再双酶切后跑胶回收,这样会浓度会高一点

感觉PCR产物浓度太低了,我做胶回收的话一般情况下是25ul的PCR体系做三管来胶回收,这么搞下来的话估计回收不了多少。
6楼2018-10-31 21:32:50
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ynqqmima

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
等的时间太长,降解了?
7楼2018-11-27 11:00:55
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sandglass7

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲,你找到原因了吗?我也遇到这种情况,切一个小时后就只有拖带了,连接后菌落pcr条带对,但质粒酶切验证是空载体

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8楼2018-11-27 20:19:55
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青绦

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酶切产物再pcr吗

发自小木虫Android客户端
9楼2019-01-10 22:48:56
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