应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 乙醇浓缩DNA
【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
131/2返回列表12下一页
查看: 3257  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者wdd608将赠送您 20 个金币

wdd608

新虫 (初入文坛)

[求助] 乙醇浓缩DNA已有2人参与

用试剂盒提出来DNA之后，浓度很低，于是通过乙醇沉淀DNA的方法来浓缩DNA，想让DNA浓度提高，这是步骤：
1．按照待沉淀溶液体积的1/10添加3M的NaAc溶液（醋酸钠），同时按照溶液体积的2－2.5倍添加无水乙醇，充分振荡混匀。（1ml溶液加入100ulNaAC溶液和2－2.5ml无水乙醇，顺序不可颠倒）
2．－20静置20min（可长期保存）
3．12000rpm 离心 20min
4．去上清，加入70％乙醇1ml洗涤（沉淀多可以增加体积），稍加振荡后离心，12000rpm，10min
5．重复（步骤4）2－3次
6．去上清，瞬时离心将残余70％乙醇甩到管底，移液器吸净上清
7．开盖风干5min，注意没有醇味即可，不要过干
8．纯水适当体积溶解（尽量少），注意：很多沉淀会附在管壁，注意溶解时反复吹打相应扇面的管壁。
但是第3步的时候根本没有沉淀，硬着头皮做下来，检测发现就只有水，浓度在0.3左右，请问是怎么回事？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼2018-08-26 16:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

602059625

金虫 (知名作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-31 08:23:54
要浓缩，真空抽干就可以，
乙醇沉淀也会损失一点，通常要DNA浓度较高才用乙醇

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
2楼2018-08-27 01:54:40
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

WEEEEEE

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定你的菌没有被污染吗
赞一下 回复此楼
3楼2018-08-27 12:19:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdd608

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 602059625 at 2018-08-27 01:54:40
要浓缩，真空抽干就可以，
乙醇沉淀也会损失一点，通常要DNA浓度较高才用乙醇

真空抽干也看到别人提过，具体操作是什么呢？是不是必须得有个仪器。
赞一下 回复此楼
4楼2018-08-29 16:33:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

balalalabala

新虫 (小有名气)
冷冻干燥试一试，就是需要有仪器
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-29 19:21:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdd608

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by balalalabala at 2018-08-29 19:21:42
冷冻干燥试一试，就是需要有仪器

冷冻干燥？？？
回复此楼
6楼2018-08-29 19:55:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

602059625

金虫 (知名作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-31 08:24:22
引用回帖:
4楼: Originally posted by wdd608 at 2018-08-29 16:33:36
真空抽干也看到别人提过，具体操作是什么呢？是不是必须得有个仪器。...

真空干燥有专门的仪器，
没有仪器就土办法，就是时间长一些
放到密闭容器里，里面放变色硅胶吸湿
拿电吹风吹
放超净台开口处吹

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
7楼2018-08-29 21:40:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdd608

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 602059625 at 2018-08-29 21:40:12
真空干燥有专门的仪器，
没有仪器就土办法，就是时间长一些
放到密闭容器里，里面放变色硅胶吸湿
拿电吹风吹
放超净台开口处吹
...

用这些办法会不会损失很多DNA，还有感觉会被污染吧。。。
赞一下 回复此楼
8楼2018-08-30 10:46:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

602059625

金虫 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wdd608 at 2018-08-30 10:46:29
用这些办法会不会损失很多DNA，还有感觉会被污染吧。。。...

这些办法我都没用过，
超净台吹出来的风应该是干净的，
也不知道的的DNA浓度到底有多底

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
9楼2018-08-30 11:18:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

602059625

金虫 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wdd608 at 2018-08-30 10:46:29
用这些办法会不会损失很多DNA，还有感觉会被污染吧。。。...

DNA还是不那么容易降解的，PCR 95度都没事

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
10楼2018-08-30 11:21:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wdd608 的主题更新
131/2返回列表12下一页
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫 论文翻译-EnPapers美助理教授团队-SCI英文润色
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 博士招生 +3 zx179 2024-04-24 5/250 2024-04-24 09:35 by Eskey
[教师之家] 国内科研环境差导致国内科研水平差的根源 +9 zju2000 2024-04-18 10/500 2024-04-24 09:09 by ckxbear
[博后之家] 南京大学-广州大学联合招聘博士后 欢迎广大优秀人才！！！ +4 黑魔变身啾 2024-04-20 10/500 2024-04-24 07:46 by dodonaomi
[公派出国] 東京大学 应用化学专业柳田研究室 招收修士/博士生 +5 蝶梦123 2024-04-19 5/250 2024-04-23 22:40 by 90472jvvh
[硕博家园] 聊天 +8 暮色恋伊人 2024-04-22 9/450 2024-04-23 21:50 by 神圣省
[论文投稿] 无under review，直接DIP，咋么办。 +10 lizhengke06 2024-04-19 16/800 2024-04-23 19:15 by 化学程序员
[有机交流] 紧急求助，有谁用过三甲基硅醇钾TMSOK吗？ 1000+3 genius2008 2024-04-19 8/400 2024-04-23 16:57 by czyzsu
[硕博家园] 考研，求职还是考编? +10 xizj 2024-04-21 18/900 2024-04-23 16:37 by 别吵i
[硕博家园] 哎 +8 s150535912 2024-04-18 9/450 2024-04-23 15:48 by huixiong0627
[基金申请] 颜宁:基础研究应顶天立地,立地即从需求端作为问题的出发点,立项背景就是面向真实需求 +10 zju2000 2024-04-18 10/500 2024-04-23 11:46 by 稻花香
[论文投稿] 编辑返稿让改格式，这个时候能大修内容吗？ +6 双倍好运锦鲤 2024-04-17 9/450 2024-04-23 09:49 by fslaser
[考博] 研二光催化6月底4篇2区 +7 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-23 06:59 by byron2012
[论文投稿] 一直找不到审稿人 +4 lizhengke06 2024-04-21 5/250 2024-04-22 23:37 by topedit
[考博] 25申博记录贴 +6 我属驴核动力驴 2024-04-18 12/600 2024-04-22 15:50 by 诩雾
[考博] 申请24博士 材料/化工/环境 +5 满目_星辰 2024-04-17 6/300 2024-04-22 13:17 by 雄关不惧
[考研] 问题已经解决。 +13 lekinna 2024-04-19 30/1500 2024-04-22 13:09 by 矛dei到
[论文投稿] 研究光催化的，好中的三四区 20+3 sl.0117 2024-04-20 3/150 2024-04-22 09:53 by bobvan
[论文投稿] 编辑是选国外的好还是国内的好。 +8 lizhengke06 2024-04-20 8/400 2024-04-22 08:58 by cuiyunjian
[有机交流] 紫外光谱 50+3 54胡 2024-04-17 3/150 2024-04-19 10:48 by Nanamiwww
[基金申请] 国自然青年基金只有一篇能第一标注，其他都是第二标注能结题吗？ 10+4 lice_1987 2024-04-18 6/300 2024-04-19 08:29 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭