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嘿嘿嘿嘿mc铜虫 (初入文坛)
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[求助]
求助大神！制备的细菌纤维素无法成膜而是豆腐渣状，哪里做错了？
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本人材料方向小白一名，准备培养一点细菌纤维素，操作方案如下： （1）5g葡萄糖、1g蛋白胨、1g酵母浸粉、0.56g磷酸氢二钠、柠檬酸0.23g，加温溶解于蒸馏水中并定容，制得500ml液体培养基。检测pH为5。 （2）把上述制备好的液体培养基分别以50ml的体积加入若干100ml的锥形瓶中，用纱布封死，用绳子缠住瓶口，放入高压灭菌锅内，在121摄氏度条件下灭菌30分钟。 （3）打开超净工作台，提前打开紫外和通风预处理30min。然后用接种棒接种2-3针细菌到培养基上。 （4）将锥形瓶放入30摄氏度的恒温摇床内，以160r/min的转速，摇晃24小时。 （5）24小时后停止摇床，以30度的条件静止培养5-7天。 问题如下： （1）因为实验室灭菌锅比较老旧，温度最高只能保持在110摄氏度，温度的影响大不大呢？ （2）因为纱布封口不是密封，在灭菌之后水分有所蒸发，pH从5降到了4.4左右，会导致细菌的死亡吗？ （3）菌是从淘宝买的甘油菌，接种操作是用接种棒在菌里搅一下，然后再在培养基里搅一下，这个操作标准吗？ 培养7天之后制备出来的细菌纤维素就和豆腐渣一样在瓶底  ，烘干测了红外，确实和纤维素的特征峰吻合，但是我实验的本意是想培养膜状的，希望大神们不吝赐教啊~~~~ |
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