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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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19950515lai

新虫 (初入文坛)

[交流] 如何减少细胞培养时的死细胞?已有2人参与

细胞传代时,细胞长的时候同时也有很多死细胞,求助有什么方法可以使死细胞减少?

如何减少细胞培养时的死细胞?
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天涯不归路

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分析你养的原因了?  是不是密度太大了?  是不是养分不够,是不是氧气不够!是不是提前进入凋亡了!根据你的实验去分析了!甚至可能你培养过程可能偶尔超温 给热死了呢。就那一句话没法分析啊!
为了明天而努力
2楼2018-08-01 17:14:26
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shgnsw

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传代后死细胞比较多的话,估计是传代过程中消化过度,又或者是没有消化完全,靠吹打下来机械损伤比较严重
3楼2018-08-01 19:29:49
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19950515lai

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by 天涯不归路 at 2018-08-01 17:14:26
分析你养的原因了?  是不是密度太大了?  是不是养分不够,是不是氧气不够!是不是提前进入凋亡了!根据你的实验去分析了!甚至可能你培养过程可能偶尔超温 给热死了呢。就那一句话没法分析啊!

就是正常悬浮培养的细胞,前面几代还是好好的,后面开始死细胞开始增多了,都是2天一传,传代密度是1*10^6 cells/ml,试过低速(500rpm)离心试图想把死细胞离掉,没有效果,培养条件都是125ml 摇瓶,装液量30ml,37℃,5%CO2恒温培养箱,细胞还是在长,长得过程中死细胞也多,就是想尽量减少死细胞
4楼2018-08-03 16:39:16
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19950515lai

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3楼: Originally posted by shgnsw at 2018-08-01 19:29:49
传代后死细胞比较多的话,估计是传代过程中消化过度,又或者是没有消化完全,靠吹打下来机械损伤比较严重

养的是悬浮细胞。。。
5楼2018-08-03 16:40:20
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shgnsw

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5楼: Originally posted by 19950515lai at 2018-08-03 16:40:20
养的是悬浮细胞。。。...

看你强调传代时,还以为是贴壁细胞。悬浮细胞死细胞目前没有很好的办法去除,只能通过不断传代来稀释。如果是培养过程不断有死细胞产生,可以考虑下试剂的原因。

发自小木虫Android客户端
6楼2018-08-03 16:52:11
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4楼: Originally posted by 19950515lai at 2018-08-03 16:39:16
就是正常悬浮培养的细胞,前面几代还是好好的,后面开始死细胞开始增多了,都是2天一传,传代密度是1*10^6 cells/ml,试过低速(500rpm)离心试图想把死细胞离掉,没有效果,培养条件都是125ml 摇瓶,装液量30ml, ...

做一下细胞生长曲线,看看,是不是培养时间也有问题,或者温度  CO2那些都检查一下,是不是有问题了!或者换个大的摇瓶或者增加一下营养试试看。
为了明天而努力
7楼2018-08-03 18:50:31
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19950515lai

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引用回帖:
6楼: Originally posted by shgnsw at 2018-08-03 16:52:11
看你强调传代时,还以为是贴壁细胞。悬浮细胞死细胞目前没有很好的办法去除,只能通过不断传代来稀释。如果是培养过程不断有死细胞产生,可以考虑下试剂的原因。
...

谢谢你的建议
8楼2018-08-03 19:43:19
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19950515lai

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引用回帖:
7楼: Originally posted by 天涯不归路 at 2018-08-03 18:50:31
做一下细胞生长曲线,看看,是不是培养时间也有问题,或者温度  CO2那些都检查一下,是不是有问题了!或者换个大的摇瓶或者增加一下营养试试看。...

谢谢你的建议
9楼2018-08-03 19:44:35
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