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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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青萍之沫

新虫 (职业作家)

[交流] 连接不上已有5人参与

我用pColdI载体双酶切,酶是sacI和xbaI,然后与酶切后的外源片段连接,能够长斑,但是菌液pcr鉴定不出来,这是为什么,已经做了好久了。

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kangaroo0513

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要不要丢给我们连呀~~
2楼2018-07-30 12:31:55
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木元雨

木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我以前也遇到过这种情况,虽然用的不是你这种载体。你可以把所有的实验步骤都仔细看一遍,从培养基配制,筛选抗性,酶切后产物的回收等一条条的排除问题

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3楼2018-07-30 12:44:45
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青萍之沫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-30 12:44:45
我以前也遇到过这种情况,虽然用的不是你这种载体。你可以把所有的实验步骤都仔细看一遍,从培养基配制,筛选抗性,酶切后产物的回收等一条条的排除问题

那你是怎木解决的

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4楼2018-07-30 15:08:15
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Agonilb

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的载体大小和基因大小差不多,这样可以切开吗吗

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5楼2018-07-30 17:50:10
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青萍之沫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Agonilb at 2018-07-30 17:50:10
我的载体大小和基因大小差不多,这样可以切开吗吗

我感觉我的也是没有酶切干净

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6楼2018-07-30 17:56:17
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Agonilb

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 青萍之沫 at 2018-07-30 17:56:17
我感觉我的也是没有酶切干净
...

那要不再试试吧

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7楼2018-07-30 18:04:46
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青萍之沫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Agonilb at 2018-07-30 18:04:46
那要不再试试吧
...

试了两遍了,不知道为什么

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8楼2018-07-30 18:09:25
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Agonilb

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要不做个对照,换载体。你要多试几次呢,不要灰心,实验就是这样,比较麻烦,得好好强大自己加油,多试几次

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9楼2018-07-30 18:16:37
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青萍之沫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Agonilb at 2018-07-30 18:16:37
要不做个对照,换载体。你要多试几次呢,不要灰心,实验就是这样,比较麻烦,得好好强大自己加油,多试几次

嗯嗯,我是不怕失败的,就是不知道问题出在哪

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10楼2018-07-30 18:22:12
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