查看: 750  |  回复: 15
【悬赏金币】回答本帖问题,作者暴走的小鱼干将赠送您 5 个金币

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

[求助] race菌液测序后如何知道这是我需要的序列已有1人参与

我在测序的上面找到了自己的特异性引物,但是找不到试剂盒里面的short primer(upn),那我是不是没找到这个引物就表示失败了
请问测序后的这个序列我到底要如何分析才知道我测得这个是正确的

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-23 22:20:19
特异性引物是通过已知的一部分序列来设计的,按道理来说应该是一个特异性引物,一个upm引物,而你没找到upm引物会不会发生了单向扩增?

发自小木虫Android客户端
2楼2018-07-23 16:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-07-23 16:42:36
特异性引物是通过已知的一部分序列来设计的,按道理来说应该是一个特异性引物,一个upm引物,而你没找到upm引物会不会发生了单向扩增?

还有一个问题,我明明菌检出来是2000多的片段,测序出来,上引到下引的长度才一两百

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-07-23 21:36:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暴走的小鱼干 at 2018-07-23 21:36:30
还有一个问题,我明明菌检出来是2000多的片段,测序出来,上引到下引的长度才一两百
...

菌液PCR出来2000多?
4楼2018-07-24 09:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-07-24 09:40:55
菌液PCR出来2000多?...

菌液跑pcr2000多啊,但是测序出来却只有一两百

发自小木虫IOS客户端
5楼2018-07-24 18:38:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 暴走的小鱼干 at 2018-07-24 18:38:13
菌液跑pcr2000多啊,但是测序出来却只有一两百
...

这个问问测序公司,我也想不通

发自小木虫Android客户端
6楼2018-07-24 19:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuyuzhi

新虫 (正式写手)

一道生物支持你
17343151072目前在一道生物,常联系
7楼2018-07-26 16:48:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cmjll

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 暴走的小鱼干 at 2018-07-24 18:38:13
菌液跑pcr2000多啊,但是测序出来却只有一两百
...

会不会是你菌液PCR扩反了,扩成载体序列了
8楼2018-07-30 14:32:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Agonilb

新虫 (小有名气)

测序后,和你的上下游引物比对,你的上游引物(自己的引物)到扩出来的序列之间应该有一部分和你的已知序列重叠,用三个(上下游引物,已知序列)比对看看

发自小木虫Android客户端
9楼2018-07-30 18:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Agonilb

新虫 (小有名气)

其实我的测序也是不合适,引物能匹配上,但测出来序列总是引物上游碱基多于下游碱基,

发自小木虫Android客户端
10楼2018-07-30 18:01:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暴走的小鱼干 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 这下可以安心休息了 +13 文竹静心 2020-01-26 13/650 2020-01-27 09:44 by 木兰兰
[医学] 新型冠状病毒多少米以外安全? +8 诸葛月英 2020-01-25 8/400 2020-01-27 00:34 by aliandbat
[博后之家] 博士后面上基金国内外研究现状及研究价值只能写1000字 +3 liu12045257 2020-01-26 3/150 2020-01-26 22:40 by dicky_you
[硕博家园] 是地方985大学博士好还是中科院不知名研究院的博士好呢? +10 Monica0-0 2020-01-25 10/500 2020-01-26 20:54 by smithson
[留学DIY] CSC申请失败能自费吗 +19 钱甜甜 2020-01-21 59/2950 2020-01-26 20:53 by Tombé
[基金申请] 评审人以代表作有MDPI旗下SCI论文或Hindawi论文或access为由给C的话,可以申辩吗 +11 傲我华科 2020-01-23 11/550 2020-01-26 19:57 by neuxutiewei
[基金申请] 2020年自然基金申请交流专帖 +13 天天向上3035 2020-01-24 19/950 2020-01-26 17:47 by fennhuie
[硕博家园] 满满的爱 (金币+2) +13 WendyO2 2020-01-22 23/1150 2020-01-26 11:19 by huige0712
[论文投稿] 退修还放着 +5 pingfanm 2020-01-25 6/300 2020-01-26 09:31 by 好一个颖果
[找工作] 讨论一个问题,大学老师是不是最轻松的职业?大学老师vs高职老师,全方位比较分析 +7 没羽箭张清 2020-01-23 8/400 2020-01-25 23:32 by lala8
[考博] transactions类的文章申博能用吗? +5 青衫衫衫 2020-01-24 5/250 2020-01-25 09:05 by chendb1234
[公派出国] 有人了解比利时租房多少钱吗 +4 dushiba9 2020-01-22 4/200 2020-01-23 15:56 by IAMCZY2013
[教师之家] 目光所及皆是如你我般的人来人往。 +7 dou21114 2020-01-21 14/700 2020-01-23 11:48 by dou21114
[硕博家园] 恭喜一下对象,可怜一下我自己。 +7 红豆007 2020-01-22 11/550 2020-01-23 09:54 by lyf1850
[论文投稿] 是不是国内期刊放假了呀? +5 许阿天 2020-01-22 8/400 2020-01-23 01:23 by 许阿天
[教师之家] 回家,也很忙 (金币+2) +14 一心一意? 2020-01-20 19/950 2020-01-22 22:04 by zgl890919
[教师之家] 2019年收入 +27 dongtian1982 2020-01-20 32/1600 2020-01-22 16:46 by 烟雨星洲
[论文投稿] 如何自己发论文 +7 李天顺 2020-01-21 9/450 2020-01-22 16:34 by hmouse
[公派出国] 寻找phDoffer +8 Nanyyy 2020-01-21 13/650 2020-01-22 09:41 by lyf1850
[公派出国] 雅思复议期间能提交公派申请语言成绩吗? +8 叶雪安冬 2020-01-20 16/800 2020-01-21 23:46 by 叶雪安冬
信息提示
请填处理意见