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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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小石头IX

木虫 (小有名气)

[求助] 酵母单杂交出现自激活——求教已有3人参与

在做酵母单杂交试验，采用的是Takara的Matchmaker™  Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System（clontech 630491），在构建好bait菌株后，进行Bait-Y1HGold 菌株 AbA最低抗性检测，发现在SD/-Ura with AbA（1000ng/ml）时，Bait 菌株仍然得不到任何抑制，Bait自激活明显。bait序列“CCACTGACGCGTTGCGCGGAGGCCGTTGAGCACCGCCGCCGCAAGGAA”。
现将bai序列重新设计为“TCGACTGACGCAGCTAGCACCGCCGCCGCAAGAGC”。
有没有大牛能否帮忙看看，之前的序列没有TATAbox，按理说不能自激活，可能的原因是酵母本身背景中相关因子结合序列，启动了报告基因。修改的序列救过PlantCare和New Place预测后，只有我要的瞬时作用元件，但还是担心会发生自激活，恳请大家帮忙看看！@wizardfan@biostar2009@飞约疯人院
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1楼2018-06-18 22:29:56
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banruozhuxin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问这个问题最后解决了么？会不会是载体系统本身的问题？我的也是，多个小片段都无法避免自激活，请问你的问题最后解决了么？
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2楼2018-11-07 10:15:40
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小石头IX

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by banruozhuxin at 2018-11-07 10:15:40
请问这个问题最后解决了么？会不会是载体系统本身的问题？我的也是，多个小片段都无法避免自激活，请问你的问题最后解决了么？

没有解决，换了两次bait序列，现在正在做，不用gold菌株，改换Y187

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3楼2018-11-07 23:31:51
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折翼小乌龟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好，我现在在做酵母单杂，出现的问题和你的一样，请问现在问题解决了吗，最后怎么就解决的
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4楼2018-12-21 19:09:06
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小仙991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

亲  我也出现了一样的问题  请问你现在做出来了么  怎么解决的
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5楼2018-12-27 21:56:09
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