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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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双鱼座的彤儿

新虫 (小有名气)

[交流] WB啊,做了很久MyD88蛋白做不出来,总有背景已有2人参与

这个蛋白做了一个月了,各种方法都试了,封闭过夜,减少一抗浓度,二抗浓度,增加洗膜次数,然而还是有很深的背景,反而目的蛋白条带不明显了,最近发现多切的没有样品的胶也曝光后也有颜色,所以怀疑可能不是背景,但是同一块胶上的内参蛋白结果还可以。求助大神们!我快被WB逼疯了!!!

WB啊,做了很久MyD88蛋白做不出来,总有背景


WB啊,做了很久MyD88蛋白做不出来,总有背景-1


WB啊,做了很久MyD88蛋白做不出来,总有背景-2


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双鱼座的彤儿

新虫 (小有名气)

2楼2018-06-04 14:10:41
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你用的是哪个公司的抗体,是否是单抗,如果兔多抗,建议换单抗来做,另外你的封闭,一抗二抗稀释缓冲液建议用5%的脱脂奶粉TBST配置,第一张还可以。

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3楼2018-06-04 16:45:43
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双鱼座的彤儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-06-04 16:45:43
你用的是哪个公司的抗体,是否是单抗,如果兔多抗,建议换单抗来做,另外你的封闭,一抗二抗稀释缓冲液建议用5%的脱脂奶粉TBST配置,第一张还可以。

Santa公司的,单克隆抗体,就是用5%脱脂牛奶配的一抗二抗

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4楼2018-06-04 20:57:14
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Budaogao

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
真巧,我也做myd88

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5楼2019-01-24 21:23:14
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Budaogao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhu0612331 at 2018-06-04 16:45:43
你用的是哪个公司的抗体,是否是单抗,如果兔多抗,建议换单抗来做,另外你的封闭,一抗二抗稀释缓冲液建议用5%的脱脂奶粉TBST配置,第一张还可以。

百分之5和百分之20效果差异是什么啊请问

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6楼2019-01-24 21:25:07
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