24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 2054  |  回复: 27
【悬赏金币】回答本帖问题,作者labinnah将赠送您 50 个金币

labinnah

金虫 (正式写手)

[求助] 四面体DNA电泳图条带问题

求助各位大神,小弟做四面体的PAGE,如图,做了几次都是这种结果,有几个问题弄不明白:
1:单链经过长时间电泳后较模糊,但是时间不够的话3-4条链的杂交产物又跑不出来。那么电泳一般控制在多久比较合适?
2:单链还好,2-4条链的产物就和marker不在一个水平面了,四面体都是这样的吗?我觉得起码2条链的结合产物理论上应该也能与marker对得上的。
3:戴手套摸胶后都会留下黑影,这个怎么办?

PAGE条件为10%的PAGE胶,DNA浓度1uM,点样10uL。先180V电泳15min后换90V继续电泳1h40min。
链1-链3都是55bp,链4为89bp。

快疯了,求大神释疑,万分感谢。

四面体DNA电泳图条带问题
图片1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

aishida

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2018-05-21 21:14:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

aishida

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

2楼2018-05-21 21:13:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

labinnah

金虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by aishida at 2018-05-21 21:14:04
你可以参考中科院林美华的博士毕业论文

多谢老铁,我去看看。
4楼2018-05-22 09:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misenry

新虫 (小有名气)

楼主你这个做出来了吗,后来做成什么样子了?我也在做这个,条带位置跟你差不多,但是文献都是在200bp,所以感觉很奇怪
5楼2018-05-31 20:13:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misenry

新虫 (小有名气)

你的55bp的单链是带氨基的吗?
6楼2018-05-31 20:21:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

labinnah

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by misenry at 2018-05-31 20:13:54
楼主你这个做出来了吗,后来做成什么样子了?我也在做这个,条带位置跟你差不多,但是文献都是在200bp,所以感觉很奇怪

后来我就没做了。。。。。 连续几次都是这样,有的只有条带明显不明显的区别,位置都没变。我的55bp是带巯基的。
你做的电泳条件是什么?
7楼2018-06-01 09:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misenry

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by labinnah at 2018-06-01 09:31:06
后来我就没做了。。。。。 连续几次都是这样,有的只有条带明显不明显的区别,位置都没变。我的55bp是带巯基的。
你做的电泳条件是什么?...

我的是55bp带氨基的,第一条链是91bp。条带位置跟你差不多。我胶的浓度是15%,预跑胶是100V,50min;最后是150V,50min;你的胶的浓度是多少啊?
8楼2018-06-01 09:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misenry

新虫 (小有名气)

好像胶的浓度会影响相对于DNA marker的位置。
9楼2018-06-01 09:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

labinnah

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by misenry at 2018-06-01 09:58:23
好像胶的浓度会影响相对于DNA marker的位置。

恩,单链位置都差不多,但是都不是太明显,包括最下面的marker,不知道是跑出去了还是只是看不清楚。可能跑时间长了,染色时间也长,就不见了。
PAGE条件为10%的PAGE胶,DNA浓度1uM,点样10uL。先180V电泳15min后换90V继续电泳1h40min。
我看到樊春海组的是8%的胶,80V 3h。也看的有些文献里的条带与marker是对不齐的,杂志也认,就很不懂了
10楼2018-06-01 10:09:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 labinnah 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研英语带学 +5 choice666 2024-04-18 5/250 2024-04-19 10:39 by 阿777
[考研] 298求调剂 +8 孙大大@ 2024-04-17 8/400 2024-04-19 10:25 by juncaixing
[找工作] 家乡二本高校/沿海传统私企,如何抉择? 10+5 化学巷 2024-04-15 13/650 2024-04-19 09:54 by 光催京城
[育儿交流] 小孩7岁,上一年级,不自信,学习较差 10+7 ljaxida 2024-04-16 30/1500 2024-04-19 09:13 by tangfh1973
[论文投稿] 最近遇到这样一个问题 4+3 asd123gfa689 2024-04-18 6/300 2024-04-18 18:43 by chaodanming
[基金申请] 申请省自然科学基金,研究区能否是省外区域 100+3 喜欢兔兔的我 2024-04-15 11/550 2024-04-17 23:49 by 喜欢兔兔的我
[考研] 275求调剂 +8 调剂0856 2024-04-14 10/500 2024-04-17 23:23 by 华北刘兵
[公派出国] CSC在职申请求问 +5 Amber0919 2024-04-16 5/250 2024-04-17 16:15 by liaojiayan
[有机交流] 怎么清洗烧瓶 20+5 ww34523 2024-04-16 6/300 2024-04-17 15:20 by 591950582
[考研] 345 求调剂 +5 南风轻语5 2024-04-12 7/350 2024-04-17 07:58 by 机械考研学生
[考研] 332求调剂 +3 木叶下1999 2024-04-16 5/250 2024-04-17 00:56 by angeliar
[考研] 土木工程281求调剂 +4 乔兮木 2024-04-13 4/200 2024-04-16 21:40 by zjl渐行渐远
[基金申请] 迟国泰通过向学生发放劳务费再回收的方式套取科学基金重点项目 +6 babu2015 2024-04-13 7/350 2024-04-16 20:32 by sundiv
[考研] 求调剂 +4 鹿萌月yy 2024-04-15 5/250 2024-04-16 16:16 by chenweiwade
[有机交流] 粗产品在甲醇中回流2次是啥意思? +4 DDT. 2024-04-12 9/450 2024-04-16 12:01 by 宁静远行
[考研] 食品工程考数学283还能有什么调剂选择 +7 宇宙无敌美少女 2024-04-12 8/400 2024-04-16 10:11 by cyclodextrin726
[考研] 329求调剂 +18 王郁洁哈哈哈 2024-04-14 26/1300 2024-04-15 19:10 by mumin1990
[考研] 材料与化工267求调剂 +5 工科材料267 2024-04-15 8/400 2024-04-15 14:11 by wyx颖颖
[考研] 280求调剂 +4 黑皮冰棒 2024-04-12 7/350 2024-04-14 23:06 by 永字号
[考研] 323求调剂 +15 啊Q精神~ 2024-04-13 17/850 2024-04-14 12:44 by qjhawk
信息提示
请填处理意见