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七弦凝霜丶

铁虫 (小有名气)

[交流] 合成多肽药物的药代动力学实验

我的研究方向是一种GLP-1受体激动剂抗菌肽的药代动力学，使用液质联用定量，家兔取血，血浆预处理使用肝素抗凝，萃取，吹干，溶于乙腈进样，沉淀血浆蛋白的步骤会不会对我的多肽药物造成影响呢？另外想请问做蛋白多肽药物的大神们常用的色谱条件是怎样的？打算预实验之前把条件摸好。研一萌新，今后会持续更贴，虚心求教。

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1楼2018-04-23 11:20:17
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七弦凝霜丶

铁虫 (小有名气)
文献中，一般高效液相色谱分析多用内标法，我们实验室合成了另一条多肽(替换了原肽的赖氨酸)，前几天发现有文献做多肽药代的时候使用过替换的肽做内标，我是不是应该把这两条肽测一下色谱表现和质谱图谱再决定呢？

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2楼2018-04-23 11:29:58
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see__see

铜虫 (小有名气)
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七弦凝霜丶: 金币+1 2018-04-23 16:39:47
内标的选择、样品前处理方法，这些都需要考察吧？
也是药动学新手一枚，也不太清楚~
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3楼2018-04-23 14:30:45
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rwufrbb87

木虫 (著名写手)
感謝樓主
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4楼2018-04-23 15:16:14
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七弦凝霜丶

铁虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by see__see at 2018-04-23 14:30:45
内标的选择、样品前处理方法，这些都需要考察吧？
也是药动学新手一枚，也不太清楚~

目前觉得样品前处理方法是最困扰我的，今天要买肝素抗凝用，不知道是定肝素粉末还是买肝素钠注射液，本来打算订肝素粉末自己用生理盐水溶解配制，但有人说可以去药房买肝素钠注射液直接用，我也还在查；我看文献中针对肽类药物的液相分析，流动相有用乙腈的，有甲酸的，还有甲醇的，还有混合梯度洗脱的（梯度洗脱也不太明白原理）；萃取的有机溶剂选择也是问题，还有蛋白沉淀使用TCA三氯醋酸还是什么也要确定，要学的东西太多
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5楼2018-04-23 16:38:14
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see__see

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 七弦凝霜丶 at 2018-04-23 16:38:14
目前觉得样品前处理方法是最困扰我的，今天要买肝素抗凝用，不知道是定肝素粉末还是买肝素钠注射液，本来打算订肝素粉末自己用生理盐水溶解配制，但有人说可以去药房买肝素钠注射液直接用，我也还在查；我看文献中 ...

我们是用肝素钠的采血管~
血浆前处理一般就是蛋白沉淀法、液-液萃取、固相萃取，至于哪个方法回收率比较高就是药考察的内容了~
你们是用液相还是液质测定？
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6楼2018-04-23 18:37:20
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七弦凝霜丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by see__see at 2018-04-23 18:37:20
我们是用肝素钠的采血管~
血浆前处理一般就是蛋白沉淀法、液-液萃取、固相萃取，至于哪个方法回收率比较高就是药考察的内容了~
你们是用液相还是液质测定？...

肝素略贵吧  考虑要不要使用枸橼酸钠、EDTA盐，你们是买现成的肝素化管吗？我取一次取0.2ml全血，离心取上清，沉淀，萃取，氮吹仪吹干，流动相复溶，我们使用液相串联质谱定量，关于萃取不是很懂，萃取剂选择也是个问题，而且血浆前处理的蛋白沉淀会对蛋白药物量有影响吧？使用乙腈沉淀吗？药代动新手，求解答
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7楼2018-04-25 11:47:57
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see__see

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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7楼: Originally posted by 七弦凝霜丶 at 2018-04-25 11:47:57
肝素略贵吧  考虑要不要使用枸橼酸钠、EDTA盐，你们是买现成的肝素化管吗？我取一次取0.2ml全血，离心取上清，沉淀，萃取，氮吹仪吹干，流动相复溶，我们使用液相串联质谱定量，关于萃取不是很懂，萃取剂选择也是个 ...

其实我也是做药代的新手，没有做过多肽类药物，是否有影响就真不知道了~不过你可以比较比较，哪种方法的提取回收率比较高~
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8楼2018-04-25 14:34:31
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