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western内参和目的蛋白显不出来已有3人参与
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新人western求助！！！条带显不出来 做了三个组 但是只有一个组有条带 除了Tublin还有HO-1和Nrf2。。。做过的大神有没有知道是为什么。。。 上样量10ul，三个组都稀释到浓度到3mg/ml（已经差不多和低浓度组一样，不能再稀释） 分离胶80v 20min，浓缩胶120v 40min； 5%脱脂奶粉封闭1h，TBST洗三次 一抗5%牛血清白蛋白1：3000（说明书1：100-1：3000）4℃过夜，TBST洗三次 二抗5%脱脂奶粉室温1h，TBST洗三次 出来的图只有一个组的条带 其他都出不来，是定量的问题吗，还是组织裂解出现了问题。。。懂的大神求助!! 第一张是Tublin  20180421104851.jpg  20180421104856.jpg |
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chaosyw
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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平行样结果差异很大的话应该和操作有关，推荐一篇wb操作方面的综述吧： https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html |
2楼2018-04-22 07:53:19
zkyls
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