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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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gumingjian

木虫 (正式写手)

[求助] PCR跑胶，DNA marker 不清晰，有拖尾，请师兄师姐帮忙看下已有1人参与

配胶是用的2%的琼脂糖，加了6uL的样品，100v电压跑胶，大概跑了1h，可连DNA Marker 都不清晰，还有拖尾， 胶溶解时，反复沸腾了好几次。胶溶解后就立即取出，加入gelred，然后就倒到平板上了。不知道是哪里做错了，请有经验的师兄师姐指点一下啊，多谢啦！

PCR跑胶，DNA marker 不清晰，有拖尾，请师兄师姐帮忙看下
Administrator 2018-04-16 13hr 32min.jpg


PCR跑胶，DNA marker 不清晰，有拖尾，请师兄师姐帮忙看下-1
Administrator 2018-04-17 14hr 49min.jpg@biostar2009@biostar2009@youlinglyw@youlinglyw@wizardfan
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小木虫很好啊
1楼2018-04-17 21:04:16
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gumingjian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 龙腾92 at 2018-04-17 21:25:46
跑胶时间太长了

跑胶时间太长了会有影响吗，？以前大胶还跑过2.5小时呢，以前有几次跑胶跑的很清晰，但是相同的条件最近就跑不出来那么清晰的了

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小木虫很好啊
4楼2018-04-17 21:32:38
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gumingjian

木虫 (正式写手)
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2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-04-17 21:07:31
胶溶解的时候反复沸腾几次后摇晃一下瓶子看看胶是否澄清透明，溶解完后要冷却至不烫手时加入染色剂，轻轻摇晃后倒入胶板

谢谢，以前确实是等到胶不那么热了，再加入染色剂，不过一摇晃，里面全是泡泡，就想着热一点时加入染色剂，然后时间久一点后泡泡会消失。您觉得这步会影响到拖尾，或者条带不清晰吗？
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小木虫很好啊
5楼2018-04-17 21:57:44
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gumingjian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 无心云朵 at 2018-04-18 08:20:24
你配置凝胶的时候有没有加TAE呢？

加了TAE，以前有过忘了加的经历，全是长长的拖尾。

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小木虫很好啊
8楼2018-04-18 08:32:36
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gumingjian

木虫 (正式写手)
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9楼: Originally posted by 无心云朵 at 2018-04-18 09:04:28
那你更换一下你的电泳缓冲液，可能用久了，效果不太好～

谢谢，每隔几天就会换一次，这个问题应该不会太大。

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小木虫很好啊
10楼2018-04-18 10:48:44
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gumingjian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 木头0629 at 2018-07-06 21:54:00
请问一下，找到原因了吗，怎么解决的？...

还没有呢

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小木虫很好啊
12楼2018-07-07 07:11:39
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