查看: 750  |  回复: 15

gumingjian

木虫 (正式写手)

[求助] PCR跑胶,DNA marker 不清晰,有拖尾,请师兄师姐帮忙看下已有1人参与

配胶是用的2%的琼脂糖,加了6uL的样品,100v电压跑胶,大概跑了1h,可连DNA Marker 都不清晰,还有拖尾, 胶溶解时,反复沸腾了好几次。胶溶解后就立即取出,加入gelred,然后就倒到平板上了。不知道是哪里做错了,请有经验的师兄师姐指点一下啊,多谢啦!

PCR跑胶,DNA marker 不清晰,有拖尾,请师兄师姐帮忙看下
Administrator 2018-04-16 13hr 32min.jpg


PCR跑胶,DNA marker 不清晰,有拖尾,请师兄师姐帮忙看下-1
Administrator 2018-04-17 14hr 49min.jpg@biostar2009@biostar2009@youlinglyw@youlinglyw@wizardfan
回复此楼
小木虫很好啊
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

渊博震天

实习版主 (著名写手)

Daryl


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-04-17 23:08:09
胶溶解的时候反复沸腾几次后摇晃一下瓶子看看胶是否澄清透明,溶解完后要冷却至不烫手时加入染色剂,轻轻摇晃后倒入胶板

发自小木虫Android客户端
跌跌撞撞中成长
2楼2018-04-17 21:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

实习版主 (著名写手)

Daryl

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gumingjian: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 谢谢,我再多试试! 2018-04-19 10:18:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by gumingjian at 2018-04-17 21:57:44
谢谢,以前确实是等到胶不那么热了,再加入染色剂,不过一摇晃,里面全是泡泡,就想着热一点时加入染色剂,然后时间久一点后泡泡会消失。您觉得这步会影响到拖尾,或者条带不清晰吗?...

所以摇晃的时候轻一些,摇完之后稍微静置一下再倒就可以了。

发自小木虫Android客户端
跌跌撞撞中成长
6楼2018-04-17 22:24:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无心云朵

铁虫 (初入文坛)

你配置凝胶的时候有没有加TAE呢?

发自小木虫Android客户端
7楼2018-04-18 08:20:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无心云朵

铁虫 (初入文坛)

那你更换一下你的电泳缓冲液,可能用久了,效果不太好~

发自小木虫Android客户端
9楼2018-04-18 09:04:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

龙腾92

新虫 (正式写手)

3楼2018-04-17 21:25:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gumingjian

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 龙腾92 at 2018-04-17 21:25:46
跑胶时间太长了

跑胶时间太长了会有影响吗,?以前大胶还跑过2.5小时呢,以前有几次跑胶跑的很清晰,但是相同的条件最近就跑不出来那么清晰的了

发自小木虫Android客户端
小木虫很好啊
4楼2018-04-17 21:32:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gumingjian

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-04-17 21:07:31
胶溶解的时候反复沸腾几次后摇晃一下瓶子看看胶是否澄清透明,溶解完后要冷却至不烫手时加入染色剂,轻轻摇晃后倒入胶板

谢谢,以前确实是等到胶不那么热了,再加入染色剂,不过一摇晃,里面全是泡泡,就想着热一点时加入染色剂,然后时间久一点后泡泡会消失。您觉得这步会影响到拖尾,或者条带不清晰吗?
小木虫很好啊
5楼2018-04-17 21:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gumingjian

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 无心云朵 at 2018-04-18 08:20:24
你配置凝胶的时候有没有加TAE呢?

加了TAE,以前有过忘了加的经历,全是长长的拖尾。

发自小木虫Android客户端
小木虫很好啊
8楼2018-04-18 08:32:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gumingjian

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 无心云朵 at 2018-04-18 09:04:28
那你更换一下你的电泳缓冲液,可能用久了,效果不太好~

谢谢,每隔几天就会换一次,这个问题应该不会太大。

发自小木虫Android客户端
小木虫很好啊
10楼2018-04-18 10:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gumingjian 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 求助PDF版2018年国家自然基金的资助名单 10+3 hongmei1988 2018-08-20 8/400 2018-08-21 01:06 by 萤火虫之谷
[硕博家园] 寻博士 +7 惟真惟实12 2018-08-20 9/450 2018-08-20 22:04 by nefunefu
[硕博家园] 保研直博or学硕 +15 MrMiss_CZY 2018-08-18 42/2100 2018-08-20 14:57 by MrMiss_CZY
[基金申请] 帮忙看一下这条评语给的是B还是C +14 shaka-fz 2018-08-18 22/1100 2018-08-19 15:57 by psylhh
[分子生物] 引物设计 +3 青萍之沫 2018-08-15 4/200 2018-08-19 14:48 by 青萍之沫
[仿真模拟] 求大神解答 +3 W大头 2018-08-17 6/300 2018-08-18 11:32 by W大头
[基金申请] 三年都悲剧 +24 hu_xuying 2018-08-16 27/1350 2018-08-18 00:35 by hu_xuying
[基金申请] 分析化学口,评审意见连续两年ABB? +10 405082101 2018-08-17 11/550 2018-08-17 22:41 by hanll173
[基金申请] 第一次申请青年,刚拿到的评审意见,大家帮忙分析分析吧 +8 LJLJLJ10 2018-08-17 11/550 2018-08-17 22:26 by LJLJLJ10
[基金申请] [官方发布]关于公布2018年度国家自然科学基金申请项目评审结果的通告 +4 ekeyan 2018-08-16 6/300 2018-08-17 21:05 by yanglp
[基金申请] 强烈建议对评审专家实实施客观动态筛选 +13 aniu01 2018-08-15 17/850 2018-08-17 12:10 by ujsfq
[基金申请] 现在还是评审中,是不是就没有希望了 +17 zb0203288 2018-08-16 24/1200 2018-08-17 08:15 by Jasonluo
[基金申请] 求问批准通知书里的评审意见怎么是空白呢? +4 shwzlsc 2018-08-16 7/350 2018-08-16 22:55 by tingyu18
[基金申请] 化学部至今没有收到通知是不是就挂了 +6 argon8436 2018-08-16 7/350 2018-08-16 20:58 by ibenze
[基金申请] 基金终于终于终于终于中了。。。。。 +75 reningcheng 2018-08-16 81/4050 2018-08-16 16:10 by 飞雪做客
[基金申请] 基金落榜,继续努力! +16 zhf19841011 2018-08-16 17/850 2018-08-16 14:47 by sdaucf
[基金申请] 小木虫为啥打开这么慢了? +4 zdwhg 2018-08-16 4/200 2018-08-16 12:11 by ncdx9675
[考博] 计算机考博推荐 +3 菲菲之菲 2018-08-16 5/250 2018-08-16 10:25 by 诺亚方舟1号
[基金申请] 有没有博士毕业就申请面上的 +11 桃李满天下 2018-08-16 12/600 2018-08-16 09:37 by Wei_ren
[硕博家园] 化学 +4 化学小生98 2018-08-15 15/750 2018-08-15 22:50 by 化学小生98
信息提示
请填处理意见