【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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彩虹提泡沫

新虫 (小有名气)

[求助] 有人做Sn-2位脂肪酸的嘛?求助,或者大家一起讨论讨论呀已有1人参与

我最近在测sn-2位脂肪酸,一直测不出来,就是没有办法把甘油一酯分离出来,本来用固相萃取柱的,做不出来,今天都用薄层色谱了,不知道为什么在紫外下都没有条带……我用的GF254硅胶板,因为说它是带荧光的,所以我没有再喷其他的显色剂,点完样之后直接晾干放紫外下看,没有条带。不知道是我点样的浓度或者量太少的原因还是什么其他的原因。
       有人做过或者懂么?求指点!!!

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zinfly

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感谢参与,应助指数 +1
脂肪酸没什么多不饱和键相连,甘油上那三个酯键效果不明显,因此没有什么紫外吸收,所以254看不清楚。
直接换显色方法,碘-硅胶,硫酸乙醇都可以。
2楼2018-04-18 08:19:28
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彩虹提泡沫

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by zinfly at 2018-04-18 08:19:28
脂肪酸没什么多不饱和键相连,甘油上那三个酯键效果不明显,因此没有什么紫外吸收,所以254看不清楚。
直接换显色方法,碘-硅胶,硫酸乙醇都可以。

我用硫酸乙醇喷板了,啥也看不见了……右边三个是喷了的,用的喷壶,1ml硫酸加19ml乙醇。是我喷的方式不对么?喷太多了?
有人做Sn-2位脂肪酸的嘛?求助,或者大家一起讨论讨论呀



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3楼2018-04-18 19:41:57
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彩虹提泡沫

新虫 (小有名气)

还有我想问一下,点样是点一个点跑是么?可是我点一个点跑不出来,怀疑可能是浓度不够,我又不太好浓缩,我能不能在一个位置反复点样,直到把100ul的样品点完?

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4楼2018-04-18 19:44:21
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zinfly

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 彩虹提泡沫 at 2018-04-18 19:41:57
我用硫酸乙醇喷板了,啥也看不见了……右边三个是喷了的,用的喷壶,1ml硫酸加19ml乙醇。是我喷的方式不对么?喷太多了?

...

同学你有么有百度硫酸乙醇显色方法,这个是需要高温烘烤的,
简单点就是耐高温吹风机,吹2-5min才能显色,而且有的是颜色不停变换(加香草醛)
有的是烤板机,就是一个加热的铁板,110℃,5-6分钟左右吧,显色为止。
5楼2018-04-20 14:45:29
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zinfly

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4楼: Originally posted by 彩虹提泡沫 at 2018-04-18 19:44:21
还有我想问一下,点样是点一个点跑是么?可是我点一个点跑不出来,怀疑可能是浓度不够,我又不太好浓缩,我能不能在一个位置反复点样,直到把100ul的样品点完?

可以反复点样,要等干了以后,再点,避免点过大,扩散严重。
6楼2018-04-20 14:46:15
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彩虹提泡沫

新虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by zinfly at 2018-04-20 14:45:29
同学你有么有百度硫酸乙醇显色方法,这个是需要高温烘烤的,
简单点就是耐高温吹风机,吹2-5min才能显色,而且有的是颜色不停变换(加香草醛)
有的是烤板机,就是一个加热的铁板,110℃,5-6分钟左右吧,显色为 ...

没有注意到,那我放烘箱里烘几分钟试试?今天又做了一个板,还是没有东西……
有人做Sn-2位脂肪酸的嘛?求助,或者大家一起讨论讨论呀-1



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7楼2018-04-20 17:53:02
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zinfly

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【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 彩虹提泡沫 at 2018-04-20 17:53:02
没有注意到,那我放烘箱里烘几分钟试试?今天又做了一个板,还是没有东西……

...

硫酸乙醇是很常用的是一个通用显色剂,最好是有烤板机,或者耐热电吹风,
浓度一般是10-20%浓硫酸溶解在乙醇中。
这个显色是一个缓慢的过程,也就是那一两分钟,烤温度不够,时间不够不显色,烤过了都是黑色。
如果没有耐热吹风机,建议你用碘-硅胶吧,
8楼2018-04-21 21:42:31
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彩虹提泡沫

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8楼: Originally posted by zinfly at 2018-04-21 21:42:31
硫酸乙醇是很常用的是一个通用显色剂,最好是有烤板机,或者耐热电吹风,
浓度一般是10-20%浓硫酸溶解在乙醇中。
这个显色是一个缓慢的过程,也就是那一两分钟,烤温度不够,时间不够不显色,烤过了都是黑色。
...

我用了2,7-二氯荧光素,看文献里好多用这个的,今天做的有荧光,但是感觉不太好,扩散开不是圈,如下图。下面的是点了一个点,上面的是反复点了大概100ul。做成这样是不是不太行?我想要的是甘油一酯,应该是距离点样点最近的,可是都好小哦
有人做Sn-2位脂肪酸的嘛?求助,或者大家一起讨论讨论呀-2



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9楼2018-04-22 21:47:36
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zinfly

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9楼: Originally posted by 彩虹提泡沫 at 2018-04-22 21:47:36
我用了2,7-二氯荧光素,看文献里好多用这个的,今天做的有荧光,但是感觉不太好,扩散开不是圈,如下图。下面的是点了一个点,上面的是反复点了大概100ul。做成这样是不是不太行?我想要的是甘油一酯,应该是距离 ...

我用过这个,你应该是点板时候的问题,不要太大,而且浓度不要太高。
10楼2018-04-22 21:53:22
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