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PCR扩不出条带，跑电泳产物弥散，求大神指点啊，已有8人参与
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为什么我的PCR总是扩不出条带，想到了一些原因，也试了，但是总是弥散。不知道是什么情况。引物退火温度是58.2，我的PCR做了梯度，58，60，62换了温度，没有改善，换过不同的酶mix，高保真，Taq都用过，模板是做了梯度，1，3，6，10.5。有几次莫名的出来条带，是在我的理论范围，重复了几次，是在梯度60退火，10.5的模板，因为是模板之前稀释到250纳克每微升，所以25微体系是用了10.5微，在这个梯度上出现了条带，但是胶回收了产物，用此DNA做模板却又扩不出来，重复不出来。每次marker都没有问题，但就是PCR产物弥散，没有条带。做了10天左右，重复做了很多条件，不知道为什么一直弥散，请大神指点啊，最开始的一步做不出来，后面的实验不知道什么时候才能做 发自小木虫Android客户端 |
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xyz_su3楼2018-04-12 21:37:20
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