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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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crystalsugar

铁虫 (著名写手)
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A549细胞转染效率低怎么办
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最近在用A549细胞做Luciferase，但转染效率一直很低，用lipo3000尝试了很多次，终于把内参转进去了，Luc还是不行。也尝试用了电转，用带荧光的的质粒试的，效率也极低。大家有没有遇到类似问题？怎么办呢？？要哭了

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1楼2018-04-07 22:27:14
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crystalsugar

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
40楼: Originally posted by 北溟钓客 at 2018-04-09 14:58:57
你这个时间有点长了，一般都是共转后18h给药，给药后4个小时或者6个小时检测，...

你用的是A549吗？我之前用293T做转染效率特别高，现在给药时间已经算短的了，之前要加24小时呢！

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41楼2018-04-09 15:58:22
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liangyinxie

铁虫 (小有名气)
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邮件讨论：xieyl@nwbiotec.com

这种细胞比较困难转染
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42楼2018-04-09 19:48:06
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westcott0

新虫 (初入文坛)
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祝福实验是难做的，特别是生物相关，不懂的地方可以找我讨论

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36楼2018-04-08 09:44:14
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crystalsugar

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
36楼: Originally posted by westcott0 at 2018-04-08 09:44:14
祝福实验是难做的，特别是生物相关，不懂的地方可以找我讨论

有做过A549细胞的转染实验吗？

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37楼2018-04-08 10:47:28
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westcott0

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
37楼: Originally posted by crystalsugar at 2018-04-08 10:47:28
有做过A549细胞的转染实验吗？
...

做过呀，看你需要什么样的结果，课题怎么设计的

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38楼2018-04-08 10:53:42
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crystalsugar

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
38楼: Originally posted by westcott0 at 2018-04-08 10:53:42
做过呀，看你需要什么样的结果，课题怎么设计的
...

我用它做质粒IFNβ-luc和Rellina共转染，24小时后加药，16小时后检测荧光。检测不到IFNβ。检测数值才两三位，特别低。但Rellina可以达到五位。

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39楼2018-04-08 13:35:02
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北溟钓客

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
39楼: Originally posted by crystalsugar at 2018-04-08 13:35:02
我用它做质粒IFNβ-luc和Rellina共转染，24小时后加药，16小时后检测荧光。检测不到IFNβ。检测数值才两三位，特别低。但Rellina可以达到五位。
...

你这个时间有点长了，一般都是共转后18h给药，给药后4个小时或者6个小时检测，
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40楼2018-04-09 14:58:57
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mariahit

新虫 (初入文坛)
★
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楼主麻烦问一下你这边lipo3000的转染质粒过程？我最近在做转染，新入门一直没有成功

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43楼2021-02-04 09:01:41
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源井生物b

新虫 (初入文坛)
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您有用其他质粒转过吗，效果如何呢，也可以尝试用慢病毒转，效率会高很多。
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44楼2021-02-10 11:35:25
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