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求指教！！！如何观察烟草毛状根gfp荧光
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在另一个版块发帖没人理啊…… 构建了带GFP的双元表达载体(潮霉素抗性)，用发根农杆菌转烟草，筛选了抗潮霉素的毛状根，用倒置荧光显微镜观察荧光。直接看根，有明显荧光，但是压片冲水后荧光就非常弱了，而且未转基因的烟草根也有轻微荧光。怀疑看到的绿色的荧光感觉是化合物的荧光。 请问大家用倒置荧光显微镜观察烟草有背景荧光吗？ 正确的图应该是什么样的，有必要冰冻切片(10微米)在激光共聚焦下面看吗？ 图1-3都是未压片、转基因的毛状根，4是20倍物镜下的视野。压片后的太弱了拍不好，空白的烟草根的纤维或者中柱也有绿色荧光，只是稍微淡一点。     发自小木虫Android客户端 |
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我觉得是你片子没有做好 之前做拟南芥 片子做好了可以直接看共聚焦 你想看细胞层面 普通荧光显微镜可能不理想 不管是是分辨率 还是光谱 PS 你用的发根农感菌是那个株系？验证过吗 发自小木虫Android客户端 |
4楼2018-04-26 10:49:29
