24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 3226  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Ivy尘

新虫 (正式写手)

[交流] 求指教!!!如何观察烟草毛状根gfp荧光

在另一个版块发帖没人理啊……
构建了带GFP的双元表达载体(潮霉素抗性),用发根农杆菌转烟草,筛选了抗潮霉素的毛状根,用倒置荧光显微镜观察荧光。直接看根,有明显荧光,但是压片冲水后荧光就非常弱了,而且未转基因的烟草根也有轻微荧光。怀疑看到的绿色的荧光感觉是化合物的荧光。
请问大家用倒置荧光显微镜观察烟草有背景荧光吗?
正确的图应该是什么样的,有必要冰冻切片(10微米)在激光共聚焦下面看吗?
图1-3都是未压片、转基因的毛状根,4是20倍物镜下的视野。压片后的太弱了拍不好,空白的烟草根的纤维或者中柱也有绿色荧光,只是稍微淡一点。

求指教!!!如何观察烟草毛状根gfp荧光


求指教!!!如何观察烟草毛状根gfp荧光-1


求指教!!!如何观察烟草毛状根gfp荧光-2


求指教!!!如何观察烟草毛状根gfp荧光-3


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suitime

铁虫 (初入文坛)

如果在上海,我们有便携式GFP激发光源,可以借给你直接观察,不用荧光显微镜,但昨天在一个客户那里,遇到同样,野生烟草和带GFP的烟草小苗根系都有很亮的绿色荧光。
3楼2018-04-25 16:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

SunRuikang

新虫 (小有名气)

2楼2018-03-21 22:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky恋

新虫 (初入文坛)

我觉得是你片子没有做好 之前做拟南芥 片子做好了可以直接看共聚焦 你想看细胞层面 普通荧光显微镜可能不理想 不管是是分辨率 还是光谱  PS 你用的发根农感菌是那个株系?验证过吗

发自小木虫Android客户端
4楼2018-04-26 10:49:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ivy尘

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by suitime at 2018-04-25 16:11:35
如果在上海,我们有便携式GFP激发光源,可以借给你直接观察,不用荧光显微镜,但昨天在一个客户那里,遇到同样,野生烟草和带GFP的烟草小苗根系都有很亮的绿色荧光。

感觉绿色的光是烟草根里次生代谢产物的光,不知道怎么消除
5楼2018-04-26 19:21:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 刚博士毕业,入职普通一本高校 +18 保持肌肤 2024-04-20 19/950 2024-04-25 18:30 by lyfbangong
[论文投稿] 催稿后秒拒 +10 lizhengke06 2024-04-19 12/600 2024-04-25 17:50 by 追分筝
[论文投稿] with editor 两个月了,什么原因? +6 yiersan9 2024-04-24 8/400 2024-04-25 15:45 by topedit
[硕博家园] 博士白读了 +37 Da_Meng_Zi 2024-04-21 41/2050 2024-04-25 14:02 by 瞬变2015
[论文投稿] 研二光催化6月底四篇二区什么水平 5+4 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-25 13:20 by 椰蛋树的曾经
[教师之家] 某种做法不行。说过几遍了。同学还那样做。再那样做就给低分 +3 河西夜郎 2024-04-24 3/150 2024-04-25 13:06 by appleapple2
[考博] 申博求助 +3 dskabdh 2024-04-24 9/450 2024-04-25 08:16 by 湛卢赤霄
[基金申请] 前同事拿我以前未中的国自然标书申请今年的国自然,现在基金委发来调查函 +33 bjdxyxy 2024-04-19 53/2650 2024-04-25 08:05 by 大雁高飞
[考研] 博士生招生!! +5 2458827884 2024-04-19 5/250 2024-04-24 22:28 by 不懂的风清
[基金申请] 企业博后是否能申请CSC博士后项目?谢谢 66+3 龙包子 2024-04-19 6/300 2024-04-24 21:59 by 3115321
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +9 wangyp123 2024-04-23 11/550 2024-04-24 19:01 by bangbangbiu
[硕博家园] 考研,求职还是考编? +13 xizj 2024-04-21 21/1050 2024-04-24 17:23 by jxdic
[基金申请] 化学结清有情发出来了 +3 starboy7286 2024-04-20 3/150 2024-04-24 15:52 by 嘿,黑贝
[有机交流] 紧急求助,有谁用过三甲基硅醇钾TMSOK吗? 1000+3 genius2008 2024-04-19 10/500 2024-04-24 12:37 by genius2008
[教师之家] 大家访学都是怎么找的啊? +3 luokereng 2024-04-22 3/150 2024-04-24 11:40 by xuechenli
[论文投稿] 无under review,直接DIP,咋么办。 +10 lizhengke06 2024-04-19 16/800 2024-04-23 19:15 by 化学程序员
[教师之家] 发现督导在听课,需要跟TA招呼示意吗?有同学看手机、课件有疏漏算大问题吗? +11 河西夜郎 2024-04-19 11/550 2024-04-23 15:01 by mylifecg
[高分子] 请问UV灯是365nm的,那么选光引发剂的波长选多少的?要完全一致吗? +4 engledd2004 2024-04-21 4/200 2024-04-22 16:08 by wangcz23
[考博] 青岛科技大学顾玉超教授课题组招收博士生 +3 yanqingwang 2024-04-19 3/150 2024-04-22 15:21 by 理科生yes
[考研] 312求调剂 +3 Leroic000 2024-04-19 3/150 2024-04-20 18:19 by xinaishan
信息提示
请填处理意见