24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 4541  |  回复: 7
【悬赏金币】回答本帖问题,作者邓大夫将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

邓大夫

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助各位:SDS-page过表达蛋白位置偏小已有1人参与

请教各位:我的目的蛋白预计大小17kD,但是考染后在11kD处出现一条很粗的条带,请问有哪些原因能导致目的蛋白变小的吗?万分感谢!
另外:1.每次跑胶整个泳道会有发虚的情况,如图,尝试过低温了,效果还不是很好,请问有什么其他办法吗?
          2.同一个样品,跑了两次,很粗的条带位置却发生了变化,变小了,请问有什么原因吗?

求助各位:SDS-page过表达蛋白位置偏小
IMG_2292.JPG
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jkli2121

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 邓大夫 at 2018-02-25 15:25:18
请教各位:我的目的蛋白预计大小17kD,但是考染后在11kD处出现一条很粗的条带,请问有哪些原因能导致目的蛋白变小的吗?万分感谢!
另外:1.每次跑胶整个泳道会有发虚的情况,如图,尝试过低温了,效果还不是很好, ...

?胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度
?? ? ? ? 抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间
3)酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物
4)目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定
5)标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2018-02-26 13:28:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 邓大夫 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 国内科研环境差导致国内科研水平差的根源 +14 zju2000 2024-04-18 16/800 2024-04-25 10:17 by shy8281
[基金申请] "颜宁:基础研究应顶天立地"能做到基础研究同时顶天立地的才是牛人 +3 zju2000 2024-04-24 3/150 2024-04-25 10:00 by shenyeqing
[论文投稿] with editor 两个月了,什么原因? +3 yiersan9 2024-04-24 5/250 2024-04-25 09:18 by xs74101122
[考博] 申博求助 +3 dskabdh 2024-04-24 9/450 2024-04-25 08:16 by 湛卢赤霄
[教师之家] 召集青年编委 +5 bergersci 2024-04-22 8/400 2024-04-25 08:04 by kangshisan
[基金申请] 企业博后是否能申请CSC博士后项目?谢谢 66+3 龙包子 2024-04-19 6/300 2024-04-24 21:59 by 3115321
[基金申请] 两类问题算是白选了~ +6 jurkat.1640 2024-04-23 10/500 2024-04-24 21:18 by lucky_my2010
[访问学者] CSC的访问学者申请,没有个评审意见,也不知道怎么改,还有必要申请吗 +4 flyingship 2024-04-20 4/200 2024-04-24 21:09 by 59038mute
[考博] 取博导收留 5+3 zzb777888 2024-04-20 7/350 2024-04-24 19:02 by zxl_1105
[基金申请] 颜宁:基础研究应顶天立地,立地即从需求端作为问题的出发点,立项背景就是面向真实需求 +11 zju2000 2024-04-18 11/550 2024-04-24 14:55 by 1501311
[有机交流] 紧急求助,有谁用过三甲基硅醇钾TMSOK吗? 1000+3 genius2008 2024-04-19 10/500 2024-04-24 12:37 by genius2008
[论文投稿] 期刊推荐 20+4 木颜尘ip 2024-04-22 7/350 2024-04-24 10:06 by bobvan
[论文投稿] 无under review,直接DIP,咋么办。 +10 lizhengke06 2024-04-19 16/800 2024-04-23 19:15 by 化学程序员
[教师之家] 发现督导在听课,需要跟TA招呼示意吗?有同学看手机、课件有疏漏算大问题吗? +11 河西夜郎 2024-04-19 11/550 2024-04-23 15:01 by mylifecg
[电化学] 有偿收购废弃锂硫电池 +3 汤圆喵 2024-04-19 5/250 2024-04-23 10:41 by Happy C
[考博] 研二光催化6月底4篇2区 +7 wjtab 2024-04-22 11/550 2024-04-23 06:59 by byron2012
[教师之家] 河海大学常州校区新进的讲师待遇如何?考核要求如何? +3 德国小球迷 2024-04-19 18/900 2024-04-22 19:23 by ZHONGWU_U
[考研] 问题已经解决。 +13 lekinna 2024-04-19 30/1500 2024-04-22 13:09 by 矛dei到
[论文投稿] 编辑是选国外的好还是国内的好。 +8 lizhengke06 2024-04-20 8/400 2024-04-22 08:58 by cuiyunjian
[考研] 312求调剂 +3 Leroic000 2024-04-19 3/150 2024-04-20 18:19 by xinaishan
信息提示
请填处理意见